| 研究課題/領域番号 |
62470122
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| 研究種目 |
一般研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
応用微生物学・発酵学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
児玉 徹 東京大学, 農学部, 教授 (30011901)
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| 研究分担者 |
五十嵐 泰夫 東京大学, 農学部, 助手 (90114363)
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| 研究期間 (年度) |
1987 – 1988
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| 研究課題ステータス |
完了 (1988年度)
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| 配分額 *注記 |
6,100千円 (直接経費: 6,100千円)
1988年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
1987年度: 5,000千円 (直接経費: 5,000千円)
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| キーワード | 水素細菌 / 高度好熱菌 / ヒドロゲナーゼ / シトクロムC / 還元的TCAサイクル / ATPシトレートリアーゼ / 高度好熱性菌 |
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| 研究概要 |
本研究おいて筆者らは以下のことを明らかにした。
1.TKー6株の末端シトクロムをシトクロム0と同定した。TKー6株にはPQQの存在が確認されたが、常法によってはフェレドキシンの存在は認められなかった。
2.菌体破壊液および膜画分で、シトクロムCがヒドロゲナーゼ反応により還元され、この反応はHQNO(シトクロムBーC_1間の電子伝達を阻害)により阻害されなかった。
3.TKー6株のCell-free extractからシトクロムCを精製し、種々蛋白化学的性質を明らかにした。
4.TKー6株の膜結合型ヒドロゲナーゼを可溶化・精製し、界面活性剤が活性増大効果を持つことを明らかにした。
5.精製したシトクロムCが部分精製ヒドロゲナーゼにより界面活性剤存在下において還元された。
6.上記1ー5の結果からTKー6株の電子伝達系の全容を明らかにした。
7.Pyruvate synthase(還元的TCAサイクルにおいて強力な還元力を必要とする反応)を逆反応の活性を指標として部分精製し、その画分がピルビン酸のカルボキシル基とNaH^<14>CO_3との交換反応を触媒したことからPyruvate synthaseがTKー6株中に確かに存在していることを明らかにした。
8.細胞破壊液、あるいは部分精製Pyruvate synthaseを用いて、種々条件下におけるAcetylーCoA依存のNaH^<14>CO_3とりこみ活性を測定したが有意なPyruvate synthase活性は検出されなかった。
9.還元的TCAサイクルの鍵酵素であるATP:citrate lyaseを精製し、同サイクルがTKー6株で働いている有力な証拠を得た。
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