| 研究課題/領域番号 |
62570119
|
|---|
| 研究種目 |
一般研究(C)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 研究分野 |
医化学一般
|
|---|
| 研究機関 | 宮崎医科大学 |
|---|
研究代表者 |
石川 栄治 宮崎医科大学, 医学部, 教授 (40029939)
|
|---|
| 研究分担者 |
河野 武幸 宮崎医科大学, 医学部, 助手 (50178224)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
1987 – 1988
|
| 研究課題ステータス |
完了 (1988年度)
|
| 配分額 *注記 |
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1988年度: 400千円 (直接経費: 400千円)
1987年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
|
|---|
| キーワード | インスリン / 抗インスリン抗体 / 酵素免疫測定法 / 抗体 / ラジオイムノアッセイ / 糖尿病 |
|---|
| 研究概要 |
抗インスリン抗体をモデルとして高感度酵素免疫測定法を開発した。抗インスリン抗体を含む血清中に少量のインスリンを添加しインスリンと抗インスリン抗体との結合物を形成させた後遊離の余剰インスリンをチャーコール処理などにより除去した。インスリンと抗体の結合物を酸処理して抗インスリン抗体を不活性化することにより解離させたインスリンを高感度酵素免疫測定法により測定した。この方法は従来法の測定感度と比べて一千倍から三千倍も高感度であった。また抗インスリン抗体と結合したヨーソ^<125>標識インスリンの放射活性を測定するラジオイムノアッセイと比べても十倍から三十倍高感度であった。そこでこの方法をインスリン治療下の患者血清中抗インスリン抗体の測定に応用したところ十八日以上インスリン治療を受けた患者ではその九十パーセント以上が抗インスリン抗体を保持していることが明らかとなった。ちなみに従来法では数パーセントの患者にのみ抗インスリン抗体が証明された。インスリン治療前のI型糖尿病患者にも僅かながら抗インスリン抗体が検出された。次にこの方法をインスリン以外の抗原に対する抗体の測定にも応用するためチャーコールやポリエチレングリコールにかえて抗イムノグロブリン抗体不溶化セファローズを用いて抗原抗体結合物を余剰の遊離抗原から分離する方法を試みた。その結果抗インスリン抗体の測定では上記の新しい測定法にはおよばないが従来法より高感度となることが明らかとなった。このような抗インスリン抗体を測定するための高感度酵素免疫測定法が一般化できるものかどうかを見極めるため抗原抗体結合物から酸処理により抗体を不活性化して抗原を解離させた結果成長ホルモン甲状腺刺激ホルモンなどの抗原性が保たれこの方法の一般化の見通しを得た。ハプテン抗体の測定については、種々検討の結果全く別の測定システムを開発することが望ましいという結論に至った。
|
