| 研究課題/領域番号 |
62570511
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
内分泌・代謝学
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
中村 浩淑 京都大学, 医学部, 助手 (60164331)
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| 研究期間 (年度) |
1987 – 1988
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| 研究課題ステータス |
完了 (1988年度)
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| 配分額 *注記 |
1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
1988年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1987年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
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| キーワード | 甲状腺ホルモン / 甲状腺ホルモンレセプター / ホルモン作用 / c-erb A / レセプター抗体 / 甲状腺細胞 / c-erb Aレセプター抗体 / c-erbA / FRT細胞 / レセプター数の変動 |
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| 研究概要 |
1.c-erb A/T_3レセプター(NT_3R)抗体の作成とその性状の検討
癌原遺伝子c-erb AがNT_3Rをコードしているという最近の研究をふまえc-erb Aの遺伝子配列をもとにポリペプチドを合成し、これに対するポリクローナル抗体を作成した。この抗体のNT_3Rに対する作用を検討し、以下の成績を得た。(1)この抗体はラット肝、腎、脳、ヒト腎から作成したNT_3Rを種、臓器差なく免疫沈降した。(2)NT_3RのT_3結合を特異的に抑制した。阻害様式は競合的で、NT_3Rの最大結合容量は変化せず、結合親和定数が用量依存性に減少した。(3)ラット肝細胞質T_3結合蛋白(CTBp)、ヒト血中サイロキシン結合蛋白(TBG)を免疫沈降せず、それらのT_3結合能に影響しなかった。(4)ラット肝抽出核蛋白をこの抗体で免疫吸収すると、T_3結合能は著明に減少するがリバースT_3結合能は変化しなかった。(5)ヒト腎cDNAライブラリーからクローニングしたα、βc-erb AcDNAを用いin vitro転写翻訳産物を作成してこの抗体と反応させた所、c-erb Aα、βとも免疫沈降した。以上、c-erb Aに対する本抗体がNT_3Rを特異的に認識すること、及びNT_3RのT_3結合領域とCTBp、TBGのそれとは異っていること、従来同一と推測されていたNT_3RとリバースT_3結合蛋白は別である可能性が強いことを明らかにした。現在この抗体を用いてNT_3Rの分析をすすめている。
2.甲状腺細胞におけるT_3レセプター
豚甲状腺細胞核にT_3結合蛋白が存在し、その諸性状はラット肝NT_3Rと同であることを明らかにした。培養甲状腺細胞FRTLにもNT_3Rが存在しその数はTSHによって負に調節されていることを発見した。これの生理的意義は未だ不明であるが、TRHが下垂体NT_3Rを減少させる成績等と合われるとレセプターを介した視床下部ー下垂体ー甲状腺系の新しい調節機構の存在を示唆するものかもしれない。
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