| 研究課題/領域番号 |
62580155
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
代謝生物化学
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| 研究機関 | 慶応義塾大学 |
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研究代表者 |
三谷 芙美子 慶応義塾大学, 医学部, 助手 (60041852)
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| 研究分担者 |
石村 巽 慶応義塾大学, 医学部, 教授 (40025599)
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| 研究期間 (年度) |
1987 – 1988
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| 研究課題ステータス |
完了 (1988年度)
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| 配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1988年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1987年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
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| キーワード | アルドステロン / アルドステロン合成酵素 / ミネラルコルチコイド / 副腎皮質球状層 / チトクロームP45011β / アンギオテンシン / 鉱質コルチコイド / チトクロームPー450 / チトクロームP_<450> |
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| 研究概要 |
強力な鉱質コルチコイドであるアルデステロン(ALD)は副腎球状層(zG)から特異的に分泌され、その分泌はACTH、アンギオテンシン系、K^+およびNa^+更には活性アミンなどで調節されることが知られている。しかしその作用機構の蛋白分子レベルでの解析は未だなされていない。その原因の1つにALD生成の最終段階を触媒する酵素の実体が不明であることが挙げられる。最近、副腎皮質ミトコンドリア(Mit)P-45011Βはこの酵素本来の作用であるステロイド11Β-水酸化、18-水酸化反応のみならず、ALD産生にまで関与する可能性が示唆された。申請者らは先ず、牛副腎皮質zG、束・網状層(zFR)の各々からMitを調製し、無傷Mit、凍結融解Mit、音波破砕MitにおけるDOCからAldに至る各反応を測定した。その結果、無傷MitにおいてはzGに活性が高くMitの構造を損うような種々の処理を加える程ALD生成能は低くなり、又層による活性の差は小さくなった。更にホモゲネートにおいてコルチコステロンの11Β-脱水素反応はzFRに強くALDの前駆体がzFRでは系から離れやすいことが判明した。次にDOCからALDへ至る反応がP45011Β1つの酵素で触媒されるか否かを検討する目的で、この間の考えられるステロイド中間体による活性への稀釈効果をみたが、いずれも有意な結果は得られず、DOCは酵素に結合すると一度も離れることなくALDまで導かれることが示唆された。次にNa-欠食で飼育したラットのzG-NitにおいてはALD生成能が高く、又、immunoblot analysisにて牛副腎より精製したP45011Βに対して産生した抗体と交叉する新たなP450の出現をみた。このALD生成能の高いP-450の分子種はtween-20存在下の液体クロマト(HPLC)によって分離可能となり従来のP45011Βとは分子量、N-末アミノ酸残基、活性のいずれにおいても異質のものであるところからALD合成酵素と命名された。現在、その新しい分子種の誘導について検討中である。
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