| 研究課題/領域番号 |
63540557
|
|---|
| 研究種目 |
一般研究(C)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 研究分野 |
動物発生・生理学
|
|---|
| 研究機関 | 北海道大学 |
|---|
研究代表者 |
鈴木 教世 北海道大学, 理学部, 講師 (10001851)
|
|---|
| 研究分担者 |
篠沢 隆雄 群馬大学, 工学部, 助教授 (30025449)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
1988 – 1989
|
| 研究課題ステータス |
完了 (1989年度)
|
| 配分額 *注記 |
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
1989年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
1988年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
|
|---|
| キーワード | 嗅受容器電位発生機構 / 環状ヌクレオチド感受性 / イオンチャンネル / 開閉のダイナミックス / 陽イオン選択性 / 陽イオンチャンネル / 嗅繊毛膜の精製 / イオンチャンネル蛋白分子 / 嗅受容機構 / 細胞内伝達 / 環状ヌクレオチド感受性イオンチャンネル / パッチクランプ / 単位コンダクタンス / 嗅繊毛膜の分離 / イオンチャンネル蛋白分子の同定 |
|---|
| 研究概要 |
嗅受容器電位発生を担う環状ヌクレオチド感受性イオンチャンネルについて、以下の成果を得た。
1.嗅細胞各部でのイオンチャンネル分布の確認:酵素処理により単離したカエルの嗅細胞各部から、パッチクランプ法でインサイドアウトパッチ膜を取り、環状ヌクレオチドを細胞内側から作用させることにより、単一イオンチャンネル活動の記録を行なった。その結果、嗅繊毛ばかりでなく、デンドライト膜、細胞体膜にも分布していること、又、このチャンネルは、cAMPばかりでなくcGMPにも感受性を持ち、リン酸化を介さずに直接作用を受けることが明らかになった。
2.単位コンダクタンス、開閉のダイナミックス、イオン選択性:二価陽イオン欠除下での単位コンダクタンスは、24pS、1uMcAMP、1uMcGMPでの平均時間は、10msであった。濃度-反応関係は、Hillの式に近似でき、その係数は、1.3-1.6で、親和性(K_<1/2>)は、3-5uMであることから、環状ヌクレオチドのイオンチャンネルに対する作用は、協同的で、結合サイトは、2つあることが推定された。又、チャンネルの一価陽イオンについての選択性は、低いことから、このイオンチャンネルは、単に、陽イオンチャンネルと呼称されべきイオンチャンネルであった。
3.イオンチャンネル蛋白分子の同定:粗製の嗅繊毛膜標本を材料にしたcAMPについての光親和性標識や、蔗糖密度勾配遠心分離による精製嗅繊毛標本についてのcAMPアフィニティ-カラム、SDS-PAGEによる検索から、35-39kDの分子質量の蛋白分子が環状ヌクレチド感受性イオンチャンネルであることが明らかになった。
|
