| 研究課題/領域番号 |
63570397
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
循環器内科学
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| 研究機関 | 神戸大学 |
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研究代表者 |
秋田 穂束 神戸大学, 医学部, 助手 (60175792)
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| 研究分担者 |
横山 光宏 神戸大学, 医学部, 助教授 (40135794)
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| 研究期間 (年度) |
1988 – 1989
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| 研究課題ステータス |
完了 (1989年度)
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| 配分額 *注記 |
600千円 (直接経費: 600千円)
1989年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
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| キーワード | 血管平滑筋 / カルシウムシグナル / G蛋白 / プロティンキナ-ゼC / セロトニン / 内皮細胞 / Calcium Spike / PhospholipaseC / ProteinkinaseC / 血管平筋筋 |
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| 研究概要 |
私たちは、家兎大動脈より血管平滑筋細胞を培養し、serotoninに対する反応をphosphoinositide turnoverの面から解析した。serotoninはInMより濃度依存性にIP_3の産生を生じることを見出した。serotoninによるphospholipase C反応へのG蛋白の関与を調べる目的で、pentussis toxin(500ng/mi)で培養平滑筋細胞を24時間前処置しておくと、serotoninによるIP_3の産生は約50%抑制された。このことより、serotoninとカップルしたphospholipase C反応にはpertussis toxinに関受性のあるG蛋白の関与が示された。Protein Kinase Cは血管平滑筋細胞を含めた種々の細胞の増殖、分化などの細胞機能に重要な役割をはたしている。Protein Kinase Cの血管平滑筋の収縮に対する作用は極めて興味深い。培養平滑筋細胞をProtein Kinase Cのactivatorとして知られているTPA(10nM)で前処置すると、sertoninに対するIP_3の産生は約75%抑制された。このことより、Protein Kinase Cはserotonin receptorとカップルしたphospholipase C反応にnegative feedbackをかけていることが明らかとなった。
次に、全体としての細胞内Ca^<2+>動員が先の細胞系においておこり得るかを調べる為に5μM fura-2 AMを40分間処置し、Nikon蛍光測光システムを用いてφ5μmのsampling pointでのCaのうごきを調べた。serotoninは10^<-8>Mより濃度依存性に細胞内Ca濃度を上昇させ10^<-4>Mでmaximumに達した。以上より、培養血管平滑筋においてserotoninはphosphoinositide tornoverを介してCaの動員をおこすことが示されたが、serotoninによるCa動員機構にCalcium channelの関与が存在するかを電気生理学的手法を用いて解析中である。
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