研究課題/領域番号 |
63570543
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研究種目 |
一般研究(C)
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配分区分 | 補助金 |
研究分野 |
内分泌・代謝学
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研究機関 | 独協医科大学 |
研究代表者 |
鈴木 仁 獨協医科大学, 医学部, 講師 (70146182)
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研究分担者 |
鈴木 義信 獨協医科大学, 医学部, 助手 (10196892)
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研究期間 (年度) |
1988 – 1989
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研究課題ステータス |
完了 (1989年度)
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配分額 *注記 |
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1989年度: 300千円 (直接経費: 300千円)
1988年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
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キーワード | Adipokinetic Hormone / ポリクロ-ナル抗体 / 膵灌流 / Adipokentic Hormone / ポリクローナル抗体 |
研究概要 |
家兎6羽を用いadipokinetic hormone(AKH)に特異的な抗体を作成し最終希釈1/200,000〜1/300,000で又^1tyr-AKHを用いTracerを作成し特異的なRadioimmunoassayを構築した。本アッセイ系での最小検出量は1.5fmolで50%結合抑制量は66fmolであった。組織分布についての検討で、ラット組織では脳下垂体、膵臓、副腎等内分泌臓器で比較的高値を認めた。ヒト消化管外科手術時の摘出標本では小腸各部位、大腸で免疫活性を認めたが部位別の差違はなかった。脳腫瘍患者、脳血管傷害患者(蜘蛛膜下出血、脳出血、硬膜下出血および脳梗塞)、正常者の脳脊髄液中に免疫活性を認めた。正常者、糖尿病患者、甲状腺機能異常患者、肝疾患患者血漿では免疫活性を認めなかった。慢性腎不全患者血漿では免疫活性を認めAKHの血漿よりの除去に腎が重要な役割を果たしていると考えられた。逆相高速液体クロマトグラフィ-、ゲルクロマトグラフィ-によるこれら免疫活性の検討では脳脊髄液および腎不全患者血漿の免疫活性は単峰性でAKHとほぼ同一と考えられたが組織中の免疫活性は多峰性を示しAKHより大分子型の占める割合が多いと考えられた。又、脳下垂体、膵臓、副腎でのAKHについて検討を行なった。ラット摘出膵灌流標本を用いて10mMアルギニンおよび18.5mMトルブタマイドを刺激物質としてインスリン、グルカゴン分泌の変化を検討した。両刺激下でAKH10^<-10>Mから10^<-6>Mの濃度で用量依存性に分泌抑制作用を認めた。雑種成犬を用いたin vivoの検討ではAKH 50pmol/kg/minの投与でACTHの有意の変動を認めた。5pmol/kg/min以下の投与での有意の血中ホルモンの変動は認められず無脊椎動物に認められる脂質動員作用も認められなかった。超遠心法によって得られる粗製膜分画を用いてレセプタ-の検討を行い、脳、肝、腎組織で特異的結合が存在すると考えられたが安定した結果が得られずアッセイ法の変更も必要と考えられた。
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