| 研究課題/領域番号 |
63570929
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
外科・放射線系歯学
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
塩入 重彰 東京医科歯科大学, 歯学部第一口腔外科, 講師 (90124693)
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| 研究分担者 |
土田 信夫 東京医科歯科大学, 歯学部口腔細菌, 教授 (60089951)
塩田 重利 東京医科歯科大学, 歯学部第一口腔外科, 教授 (70041267)
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| 研究期間 (年度) |
1988 – 1989
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| 研究課題ステータス |
完了 (1989年度)
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| 配分額 *注記 |
2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
1989年度: 300千円 (直接経費: 300千円)
1988年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
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| キーワード | ヒト口腔癌 / p21 / Rb遺伝子 / 転写調節領域 / 活性化c-H-ras-I / c-myc / ヒトロ腔癌 / 癌遺伝子 / RB遺伝子 / 活性化ras / myc / 遺伝子導入 |
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| 研究概要 |
1.ヒト口腔癌におけるras癌遺伝子産物(p21)と癌抑制遺伝子(Rb遺伝子)の発現について;抗p21モノクロ-ナル抗体を用いて、ヒト口腔腫瘍組織におけるp21の発現を検索した結果、悪性腫瘍ばかりでなく、良性腫瘍にも陽性に染まるものがあり、発現強度も相対的で確定的な評価は下せないと思われた。7例の口腔癌細胞株において、Rb遺伝子の発現を検索し、全ての細胞株で、Rb遺伝子の正常な発現を確認した。
2.ヒト活性化型c-H-ras-1とウイルスエンハンサ-あるいはmycとの相互作用の検索;
codingエキソンを全て含むが、既に同定されたヒト活性化c-H-ras-1(EJ6.6)の転写開始および調節領域を除いたEJ2.9kb SacI断片を各種腫瘍ウイルスのプロモ-タ-/エンハンサ-領域あるいはエンハンサ-領域のみの下流に正、逆の両方向に結合した組換体を作製し、培養細胞に導入し、そのトランスホ-ミング能を検討したところ、逆向きにつないだ場合でもトランスホ-ミング能をもつことが判明し、EJ2.9kb断片内に未知の転写調節領域が存在する可能性が示唆された。さらに、この断片内で、構造遺伝子の5'上流域に種々の欠失変異体を作製し、そのトランスホ-ミング能の変化を調べたところ、エキソン1のATGコドンのAを+1、その1bp上流の塩基を-1として、d1-144かdl-61の領域において急激に下がることを発見した。以上の現象はウイルスのLTRにつないだc-myc(活性化型c-myc)を同時に細胞に導入した場合も同様であり、得られた各トランスホ-マントにおいてrasとmycが発現し、活性化型p21が作られていることを確認した。従って、この領域付近にトランスホ-ミング能に影響する転写調節領域があると考えられ、LTRやc-mycタンパク質がEJ2.9kb断片を組み込んだ組換体のトランスホ-ミング能の上昇に関与していると考えられた。
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