| 研究課題/領域番号 |
63580123
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
物質生物化学
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| 研究機関 | 横浜市立大学 |
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研究代表者 |
宮崎 香 横浜市立大学, 木原生物学研究所, 助教授 (70112068)
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| 研究期間 (年度) |
1988 – 1989
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| 研究課題ステータス |
完了 (1989年度)
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| 配分額 *注記 |
1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
1989年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1988年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
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| キーワード | 増殖阻害因子 / 増殖因子 / 動物細胞 / 細胞培養 / 増殖調節 / 癌 / 精製 / 肝細胞 / 細胞分裂 |
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| 研究概要 |
正常のラットの肝臓由来の上皮性細胞株BRLと、その腫瘍性形質転換細胞株RSVーBRLを標的細胞として種々の生体材料に存在する増殖阻害因子を検索した結果、BRLとRSVーBRL自身が数種の増殖阻害因子を分泌することを見い出した。BRLの培養液からは3種類の増殖阻害因子(分子量56k、21k、<10k)を精製し、その性質については既に報告した。本年度は、主としてRSVーBRLが分泌する増殖阻害因子について検討した。RSVーBRLは、酸や熱に安定な増殖阻害因子(GIー1)と酸に不安定な増殖阻害因子(GIー2)を培養液中に分泌した。細胞外に分泌されたGIー1は、120k、30k、13kの3種のサブユニットからなる、不活性な複合体(全体の分子量300kー700k)を形成しており、酸処理や尿素処理によって活性分子を遊離した。活性型のGIー1は分子量13kのサブユニットのホモダイマ-であり、pl8.2とpl7.9の少なくとも2種類の分子が存在することが分かった。このpl8.2の因子の部分的な一次構造を解析した結果、この因子がTGFーβ1であると考えられた。GIー1は、1ng/ml以下の濃度で正常BRLに対して強い増殖阻害活性を示したが、RSVーBRLや多くのヒト癌細胞に対しては非常に弱い活性しか示さなかった。一方、GIー2は酸や熱に対して不安定で、還元剤に対しては安定な蛋白質で、分子篩クロマトグラフィにおいて10kー40kの位置に溶出した。GIー2は、GIー1と同様にRSVーBRLに比べてBRLの増殖を強く阻害した。癌細胞がこれらの増殖阻害因子を分泌するのは一見意外であるが、それらの標的細胞に対する選択性は極めて合目的である。以上の結果とは別に、兎の血清中に2種類の増殖阻害因子が存在することを見いだし、それらの精製を試みた。その結果、一方はTGFーβの一種であり、他方は以上の増殖阻害因子とは全く異なり、正常細胞に比べて癌細胞の増殖を選択的に阻害する分子量60kー70kの、酸、熱、変性剤に対して不安定な増殖阻害因子であることが分かっている。
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