| 研究課題/領域番号 |
63580155
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
代謝生物化学
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
中村 敏一 九州大学, 理学部, 教授 (00049397)
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| 研究期間 (年度) |
1988
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| 研究課題ステータス |
完了 (1988年度)
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| 配分額 *注記 |
1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
1988年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
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| キーワード | 肝細胞増殖因子 / HGF cDNA / 一次構造 / 初代培養肝細胞 / 肝再生 |
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| 研究概要 |
HGFのN末端27残基を基にIong probe及びshortprobeのオリゴヌクレオチドを合成した。これらのプローブを使ってmegakaryocytesのcDNAIibraryからHGFcDNAを、他方、ラットgenomic IibraryからHGFgeneをcloningすることを試みた。いずれのIibraryからもpositiveらしきクローンが数個得られ、そのインサートの塩基配列を決定したが、いずれもpseudo cloneであった。
他方、HGF活性がCCI_4誘発させた肝炎ラットの血清ならびに肝炎組織中に検出され、その活性レベルが肝炎の重症度とよく平行することを明らかにした。そこで、CCI_4誘導ラット肝炎組織からpoly(A)RNAを調製し、これからλgt10にIibraryを作製した。上記オリゴヌクレオチドプローブを使い、肝炎組織IibraryからHGF cDNAのscreeningを行ったところ、Iong及びshort probeともにpositiveなクローンが2個得られた。この強くpositiveになるクローンのインサートのDNA塩素配列を決定したところ、HGF cDNAの一部であることが明らかになった。現在、このHGF cDNAを用いfull size cDNAのクローニングとともにヒトgenomic libraryからヒトHGF geneのクローニングを行っている。
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