公募研究
新学術領域研究(研究領域提案型)
平成28年度は本研究の中心であるPDマーモセットモデルの確立の為、我々は野生型マーモセットに対して大腸菌由来recombinant αsynによるαsyn凝集体の線条体への投与実験を計5例行った。投与第1例目を術後1か月の段階で病理学的検討を行い、αsyn凝集体の線条体への投与を確認した。また、計5例の投与実験を行う事で周術期管理を含めた脳内投与実験方法、実験手技を確立した。ヒト由来α-synの取得に関しては、当院にてα-synのduplicationであるPARK4患者の親子例を確認しPARK4患者由来iPS細胞株を樹立した。樹立したPARK4患者由来iPS細胞のドーパミンニューロンへの効率的な分化誘導法を検討した結果、floor plate誘導後に振盪培養を行う方法を確立した。更に、分化の各段階でのα-synの発現の確認を行ったが、PARK4患者由来iPS細胞株由来のドーパミンニューロンではコントロール群と比較してα-synだけでなくドーパミンニューロンのマーカーであるtyrosine hydroxylaseも発現量の増加を認めた。また、neuron系の培養細胞であるSH-SY5Y細胞にαsyn凝集体を導入後にoligodendrocyte系の培養細胞であるKG1C細胞の共培養を行い、免疫染色法による解析を行った。その結果、KG1C細胞内でリン酸化syn陽性の細胞内凝集体の存在を確認した。KG1C細胞ではsynは発現しておらず、αsyn凝集体導入SH-SY5Y細胞と共培養したKG1C細胞にのみ確認できたことから、neuron to gliaでのαsyn凝集体伝播の可能性が見出された。
28年度が最終年度であるため、記入しない。
すべて 2017 2016 2015
すべて 雑誌論文 (5件) (うち国際共著 1件、 査読あり 5件、 オープンアクセス 5件、 謝辞記載あり 2件)
Cell Death Discovery
巻: 3 号: 1 ページ: 17013-17013
10.1038/cddiscovery.2017.13
Scientific Reports
巻: 6 号: 1 ページ: 30473-30473
10.1038/srep30473
120006557626
PLoS ONE
巻: 11 号: 4 ページ: e0151447-e0151447
10.1371/journal.pone.0151447
Neurobiology of Aging
巻: 37 ページ: 103-116
10.1016/j.neurobiolaging.2015.10.001
巻: 5 号: 1 ページ: 17625-17625
10.1038/srep17625
120006557628
