LUBACによる細胞死とIL-1b産生調節機構の解析

公募研究

研究領域	細胞死を起点とする生体制御ネットワークの解明
研究課題/領域番号	17H05502
研究種目	新学術領域研究(研究領域提案型)
配分区分	補助金
審査区分	生物系
研究機関	京都大学
研究代表者	佐々木義輝京都大学, 医学研究科, 准教授 (80323004)
研究期間 (年度)	2017-04-01 – 2019-03-31
研究課題ステータス	採択後辞退 (2018年度)
配分額 *注記	5,720千円 (直接経費: 4,400千円、間接経費: 1,320千円) 2018年度: 2,860千円 (直接経費: 2,200千円、間接経費: 660千円) 2017年度: 2,860千円 (直接経費: 2,200千円、間接経費: 660千円)
キーワード	免疫学 / シグナル伝達
研究実績の概要	HOIP欠損B細胞、マクロファージではLPS刺激によって細胞死が誘導される。まず初めに、この細胞死がどのタイプのプログラム細胞死であるかについてそれぞれのプログラム細胞死に必須の分子を抑制した場合の細胞死に与える影響を調べることで検討した。その結果、LPS刺激によるHOIP欠損B細胞の細胞死はネクロプトーシスに必須の分子RIP3の欠損によっては抑制されなかったが、さらにアポトーシスに関与する分子であるCaspaseの阻害剤であるZ-VAD-FMKを加えることによって抑制された事から、HOIP欠損B細胞のLPS刺激による細胞死はアポトーシスがメインで起こっていることが明らかとなった。次に、マクロファージ細胞株Raw264においてCRISPR/Cas9の系を用いてHOIPの発現をノックダウンした細胞株(HOIP KD Raw264)を樹立したところ、HOIPを欠損するマウス骨髄由来マクロファージと同様にLPS刺激によって成熟IL-1βの産生を認めた。このHOIP KD Raw264細胞でRIP3の発現を低下させてもLPS刺激による成熟IL-1βの産生は抑制されなかったが、RIP3とCaspase-8の発現を両方とも低下させた場合にはLPS刺激による成熟IL-1βの産生が認められなくなったことから、HOIP欠損マクロファージにおけるLPS刺激による成熟IL-1βの産生にはCaspase-8が関与していることが示された。
現在までの達成度 (段落)	翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
今後の研究の推進方策	翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。