公募研究
新学術領域研究(研究領域提案型)
新生鎖の小胞体標的化と膜組み込みにおけるハンドリング機構を追求し下記の成果を得た。①フォールディングプローブ（CP-EGFP）を開発し、細胞内での合成共役型タンパク質小胞体膜透過状況の定量解析を可能とした。それを用いて、出芽酵母細胞トランスロコン関連遺伝子の欠損株をスクリーニングし、機能に影響する遺伝子を複数見出した。それらの遺伝子に関して、下記の知見を得た。(1)Zuo1pタンパク質などの特定のリボソーム結合型細胞質シャペロン系が、合成共役型の標的化を抑制している。(2)小胞体内腔の特定のコシャペロン（Scj1pなど）が内腔Hsp70（Kar2p）の機能を抑制し合成共役型膜透過を抑制している。小胞体内腔Hsp70の新しい機能ネットワークの可能性を示唆した。(3)合成完了型膜透過因子と信じられてきたトランスロコン因子Sec71p/Sec72pが、リボソーム・トランスロコン複合体機能に関連していることを示した。(4)ペルオキシソーム膜タンパク質PMP70の小胞体標的化抑制（ETS）因子として、Nmt1を見出した。その基質ペプチド結合ポケットの変異で標的化抑制機能がなくなること、Nmt1タンパク質が直接的にN-末端モチーフに結合することなどを確認し、ETS作用にNmt1とETSモチーフとの直接結合が必要なことを明らかにした。(5)膜透過途上新生鎖の膜に分配され得ない「中度疎水性配列」（mH）が、トランスロコンで保持されることを発見した。さらに、そのようなトランスロコンの「第2機能サイト」がラテラルゲート付近および透過ポアのヒンジ側の2ヶ所にあることを見いだした。
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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Journal of Biological Chemistry
巻: 293 号: 44 ページ: 17050-17060
10.1074/jbc.ra118.003219
