| 研究領域 | ネオウイルス学：生命源流から超個体、そしてエコ・スフィアーへ |
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| 研究課題/領域番号 |
17H05810
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| 研究種目 |
新学術領域研究(研究領域提案型)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 審査区分 |
生物系
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| 研究機関 | 岩手大学 |
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研究代表者 |
福田 智一 岩手大学, 理工学部, 教授 (40321640)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2019-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2018年度)
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| 配分額 *注記 |
6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円)
2018年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
2017年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
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| キーワード | 絶滅危惧種 / オガサワラオオコウモリ / 無限分裂 / 幹細胞 / 感染症 / 培養細胞 / 無限分裂細胞 / 遺伝子導入 / ウィルス / 応用動物 / 獣医学 |
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| 研究実績の概要 |
オガサワラオオコウモリの初代培養細胞へレトロウィルスを用いて変異型CDK4、サイクリンD 、テロメラーゼ逆転写酵素(TERT)を導入することによって無限分裂を行った。驚いたことにレンチウィルスにて当初は遺伝子導入を行ったが、レンチウィルスでは数パーセント以下の遺伝子導入効率しか得られない結果となった。興味深いことに同じVSV-Gタンパク質を表面に持つレトロウィルスを用いたところ、おおよそ50%程度の遺伝子導入効率を得ることができた。この結果から変異型CDK4およびサイクリンDをポリシストリニックに発現するレトロウィルスを導入した。加えてTERT遺伝子を同じレトロウィルスにて遺伝子導入を行った。結果、G418およびハイグロマイシンの両方に耐性のオガサワラオオコウモリ由来の細胞を得ることができた。この細胞の特徴を明らかにするために、連続的な細胞培養を行った。加えてウェスタンブロットによって導入遺伝子の発現を検出した。さらに染色体解析によって遺伝子導入した細胞の染色体状態を調べた。初代培養細胞は細胞継代を行ったところ、約７回の継代操作の後に細胞老化の特徴を示した。一方、変異型CDK4、サイクリンD、TERTを導入したオガサワラオオコウモリの細胞は小型化した細胞形態を維持し、細胞増殖が可能であった。これらの特徴から我々はオガサワラオオコウモリ由来の無限増殖細胞を得たと結論した。現在、これらの結果に関して英文原著論文として投稿中である。
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| 現在までの達成度 (段落) |
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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