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植物幹細胞におけるミトコンドリア超融合とゲノム増幅仮説の検証

公募研究

研究領域植物の生命力を支える多能性幹細胞の基盤原理
研究課題/領域番号 18H04831
研究種目

新学術領域研究(研究領域提案型)

配分区分補助金
研究機関東京大学

研究代表者

有村 慎一  東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 准教授 (00396938)

研究期間 (年度) 2018-04-01 – 2020-03-31
研究課題ステータス 完了 (2019年度)
配分額 *注記
8,580千円 (直接経費: 6,600千円、間接経費: 1,980千円)
2019年度: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2018年度: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
キーワード植物ミトコンドリア / ミトコンドリア / ミトコンドリア融合 / ミトコンドリアゲノム
研究実績の概要

ミトコンドリアをGFPで可視化させた形質転換シロイヌナズナとゼニゴケを用いて,そのメリステムでのミトコンドリアの形態と動態の観察を行った.当初予想した巨大ミトコンドリアは報告ほど多数観察される訳ではないようであることが分かった.幹細胞では植物ミトコンドリアゲノムは数百倍に複製増殖され超多倍数体状態を形成し、その後連続する細胞分裂時には分配するに任せる例がいくつか報告されている。本研究ではシロイヌナズナC24を用いて,脱分化カルス化の過程でのミトコンドリアゲノムと核ゲノムのコピー数変化をqPCR法と単離ミトコンドリアの蛍光イメージングによる解析検証を行った.その結果,脱分化の過程で核ゲノムコピー数と比較したミトコンドリアDNAコピー数の顕著な増加が観察された.つまり,これから分裂増殖を行う細胞となる過程で,核ゲノムの増幅以上にミトコンドリアゲノムが増幅することがシロイヌナズナにおいても確認された.また,この脱分化/カルス化の過程で「DNA/核様体を保持するミトコンドリア」の数の割合も増加することが明らかとなった.細胞融合とその後の再生を通じて,葉緑体はどちらか一方のゲノムになるのと対照的に,ミトコンドリアゲノムは両親のゲノムが著しく組換えを起こす事が報告されている.1990年代にコセナダイコンのミトコンドリアゲノムから,非対称細胞融合によって農業上重要遺伝子である細胞質雄性不稔原因遺伝子候補ORF125を移植したナタネについて,そのゲノム構造と配列を決定した.葉緑体は完全にナタネ配列で,ミトコンドリアゲノム配列も95%ナタネで,ピンポイントにダイコン遺伝子が転移されていることが分かった.この株とイネを用いて,ミトコンドリアゲノム上の標的遺伝子破壊を行った.これにより,雄性不稔性の回復が確認され,ORF125が実際に責任遺伝子であるとの最終同定を行うことができた.

現在までの達成度 (段落)

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(2件)
  • 2019 実績報告書
  • 2018 実績報告書
  • 研究成果

    (2件)

すべて 2019 2018

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 2件)

  • [雑誌論文] Curing cytoplasmic male sterility via TALEN- mediated mitochondrial genome editing2019

    • 著者名/発表者名
      Tomohiko Kazama 1*, Miki Okuno2, Yuta Watari3, Shungo Yanase3, Chie Koizuka4, Yu Tsuruta3, Hajime Sugaya3, Atsushi Toyoda 5, Takehiko Itoh2, Nobuhiro Tsutsumi3, Kinya Toriyama1, Nobuya Koizuka 4* and Shin-ichi Arimura 3,6*
    • 雑誌名

      Nature Plants

      巻: 5 号: 7 ページ: 722-730

    • DOI

      10.1038/s41477-019-0459-z

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] The mitochondrial genome of an asymmetrically cell-fused rapeseed, <i>Brassica napus</i>, containing a radish-derived cytoplasmic male sterility-associated gene2018

    • 著者名/発表者名
      Arimura Shin-ichi、Yanase Shungo、Tsutsumi Nobuhiro、Koizuka Nobuya
    • 雑誌名

      Genes & Genetic Systems

      巻: 93 号: 4 ページ: 143-148

    • DOI

      10.1266/ggs.18-00005

    • NAID

      130007503896

    • ISSN
      1341-7568, 1880-5779
    • 年月日
      2018-08-01
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス

URL: 

公開日: 2018-04-23   更新日: 2021-01-27  

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