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重複受精を制御する因子間相互作用の解明

公募研究

研究領域植物新種誕生の原理―生殖過程の鍵と鍵穴の分子実態解明を通じて―
研究課題/領域番号 19H04852
研究種目

新学術領域研究(研究領域提案型)

配分区分補助金
審査区分 生物系
研究機関千葉大学

研究代表者

井川 智子  千葉大学, 大学院園芸学研究院, 准教授 (00360488)

研究期間 (年度) 2019-04-01 – 2021-03-31
研究課題ステータス 完了 (2020年度)
配分額 *注記
8,580千円 (直接経費: 6,600千円、間接経費: 1,980千円)
2020年度: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2019年度: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
キーワード重複受精 / 配偶子融合 / 被子植物 / タンパク質相互作用 / イメージング / 配偶子相互作用 / DMP9 / GCS1 / 配偶子 / 膜タンパク質
研究開始時の研究の概要

雄と雌の配偶子の原形質膜中に存在する膜タンパク質が重複受精制御に直接関わっている。現在までに、雄性配偶子で機能する3つの受精因子が同定されている。しかしこれらタンパク質の個々の機能は解析されているものの、互いの関係性については解析されていない。さらに、これらの雄性受精因子と相互作用する雌性配偶子のタンパク質は発見されていない。本研究では既に同定されている受精因子タンパク質をツールとして用いることで、未知の受精因子の捕捉と、その機能解析を行い、重複受精進行を担う分子メカニズムを明らかにする。

研究実績の概要

被子植物の重複受精では、2つの精細胞がそれぞれ卵細胞または中央細胞と受精する。重複受精を成功させるためには、精細胞・卵細胞および精細胞・中央細胞の2種類の雌雄配偶子ペアの確立が必要条件である。しかしペア確立制御に関与する因子は見つかっていなかった。我々は被子植物の精細胞膜に特異的に局在するDMP9が卵細胞と受精に関与しており、DMP9が欠損すると受精が阻害がされることを明らかにしている(Takahashi et al. 2018)。このDMP9機能の発見を異なる配偶子ペア確立の制御機構解明の手がかりとし、当該年度ではDMP9の更なる分子機能を追究しつつ、既知の重複受精因子(GEX2、GCS1)との関係性評価を行った。これまで個別に同定され、特徴付けられてきたそれぞれの受精因子が、重複受精進行においてどのような順序で機能し、役割分担しているのかについて明らかにすることで、重複受精制御の包括的な理解を深めることを目的とした。
DMP9の分子機能解析として、デリーション解析を行った。その結果DMP9は予測通り4つの膜貫通領域を有し、NおよびC末端側は細胞内に配向していた。膜貫通領域が1つでも欠けると精細胞での発現及び局在に影響が生じた。また、卵細胞との受精阻害を示すdmp9精細胞中のGCS1局在を観察するためのマーカーラインを作出し、胚のう内観察を行い、重複受精における受精因子の作用機序について考察した。また、膜貫通領域を欠損したGCS1バリアント(GAH)を人工的に雌の卵細胞で発現・分泌させたところ、受精阻害が観察された。これらの結果から、被子植物重複受精におけるGCS1挙動モデルを考察した。現在はこれらの知見に基づき、GAHによって補足された因子の受精における機能解析に繋がっている。

現在までの達成度 (段落)

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(2件)
  • 2020 実績報告書
  • 2019 実績報告書
  • 研究成果

    (8件)

すべて 2020 2019

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (5件)

  • [雑誌論文] Behavior of filamentous temperature-sensitive Z2 (FtsZ2) in the male gametophyte during sexual reproduction processes of flowering plants2020

    • 著者名/発表者名
      Ohashi Yukino、Mori Toshiyuki、Igawa Tomoko
    • 雑誌名

      Protoplasma

      巻: 257 号: 4 ページ: 1201-1210

    • DOI

      10.1007/s00709-020-01503-2

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Restricted Pollination for Tracing Individual Pollen Tubes in a Pistil2020

    • 著者名/発表者名
      Takahashi Taro、Mori Toshiyuki、Igawa Tomoko
    • 雑誌名

      Methods Mol Biol.

      巻: 2160 ページ: 73-81

    • DOI

      10.1007/978-1-0716-0672-8_5

    • ISBN
      9781071606711, 9781071606728
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Evaluation of Fertilization State by Tracing Sperm Nuclear Morphology in Arabidopsis Double Fertilization.2019

    • 著者名/発表者名
      Takahashi T, Igawa T
    • 雑誌名

      Journal of Visualized Experiments

      巻: 29 号: 150

    • DOI

      10.3791/59916

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 雄性配偶子の受精能獲得条件の検討2020

    • 著者名/発表者名
      芝有香, 井川智子
    • 学会等名
      日本植物学会第84回大会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] 雄側受精因子GCS1との相互作用を示す雌側受精因子の探索2020

    • 著者名/発表者名
      高橋太郎, 森稔幸, 三室周, 井川智子
    • 学会等名
      日本植物学会第84回大会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] GFP タグによる膜タンパク質単離を利用した雌側受精因子の探索2019

    • 著者名/発表者名
      高橋太郎, 井川智子
    • 学会等名
      日本植物学会第83回大会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [学会発表] 受精因子の遺伝子導入による受精能獲得条件の検証2019

    • 著者名/発表者名
      芝有香, 井川智子
    • 学会等名
      日本植物学会第83回大会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [学会発表] Gamete plasma membrane proteins regulating fertilization of flowering plants2019

    • 著者名/発表者名
      Tomoko Igawa
    • 学会等名
      第19回日本蛋白質科学学会年会 第71回日本細胞生物学会年会 合同年次大会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書

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公開日: 2019-04-18   更新日: 2024-12-25  

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