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植物の雄性配偶体形成を制御する膜交通メカニズムの解析

公募研究

研究領域植物新種誕生の原理―生殖過程の鍵と鍵穴の分子実態解明を通じて―
研究課題/領域番号 19H04872
研究種目

新学術領域研究(研究領域提案型)

配分区分補助金
審査区分 生物系
研究機関基礎生物学研究所

研究代表者

海老根 一生  基礎生物学研究所, 細胞動態研究部門, 助教 (90590399)

研究期間 (年度) 2019-04-01 – 2021-03-31
研究課題ステータス 完了 (2020年度)
配分額 *注記
8,580千円 (直接経費: 6,600千円、間接経費: 1,980千円)
2020年度: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2019年度: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
キーワード膜交通 / SNARE / ANTH / 雄性配偶子形成
研究開始時の研究の概要

膜交通はオルガネラ間の物質輸送を担う真核生物に普遍的な細胞機能であるが、その分子機構は系統毎に多様化している。植物の雄性配偶子形成においては、卵細胞との接着因子等の細胞膜への輸送制御に加え、細胞膜から不要になったタンパク質を適切に除去するエンドサイトーシスによる制御メカニズムも重要であると推測されるが、それらに関する知見は乏しい。我々は、輸送小胞に積み込まれる積み荷とその受容体、および輸送小胞と標的膜を融合させるSNARE、という膜交通における2つの「鍵と鍵穴」の解析を展開することで、雄性配偶子形成における細胞形態変化および細胞膜タンパク質組成を制御する膜交通のメカニズムとその役割を解明する。

研究実績の概要

膜交通はオルガネラ間の物質輸送を担う真核生物に普遍的な細胞機能である一方、その分子機構は系統毎に多様化し、それぞれの生物に特有の生命現象に深く関わっていることが知られている。我々は特に雄性配偶子形成を制御する膜交通のメカニズムとその役割の解明を目標とする。
シロイヌナズナの雄原細胞・精細胞で機能すると考えられるPICALM1の変異体の機能解析を進めたところ、植物の矮化等の表現型を示すものの変異の遺伝には異常が見られないことから、他のPICALMも雄原細胞・精細胞で機能していることが示唆された。また、細胞膜に局在する膜交通制御因子のうち精細胞で発現することが示唆された遺伝子について、変異体の表現型解析を行った結果、栄養細胞にも異常が見られたことから、栄養細胞特異的プロモーターで変異を相補させた株を作成し、雄原細胞・精細胞における機能解析を試みている。
ゼニゴケの雄性配偶子形成過程では、細胞膜に局在するSNAREであるMpSYP12Aが液胞に運ばれて分解される。この現象について詳細な観察から、精子変態のごく初期に細胞膜上のMpSYP12Aのほとんどが細胞内に取り込まれることを明らかにした。また、この現象のエンドサイトーシスによる制御メカニズムを明らかにするため、ゼニゴケのPICALMに注目した解析を進め、3つのPICALMのうち2つについては、葉状体においてクラスリン被覆小胞と思われる細胞膜近傍のドット状構造に局在する様子が観察される一方、残りの1つは鞭毛基部に集積して局在している様子が観察された。現在これらの変異体の作出と雄性配偶子形成過程の表現型の詳細な解析を進めている。これに加え、領域内共同研究から植物の精子形成に関わることが推定される新規遺伝子を探索を進めており、そのうち一つが基底小体に局在すること、変異体が精子の鞭毛に異常を示すことを見出した。

現在までの達成度 (段落)

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(2件)
  • 2020 実績報告書
  • 2019 実績報告書
  • 研究成果

    (13件)

すべて 2021 2020 2019 その他

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (11件) (うち国際学会 2件、 招待講演 1件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Longin R-SNARE is retrieved from the plasma membrane by ANTH domain-containing proteins in Arabidopsis2020

    • 著者名/発表者名
      Fujimoto Masaru、Ebine Kazuo、Nishimura Kohji、Tsutsumi Nobuhiro、Ueda Takashi
    • 雑誌名

      Proceedings of the National Academy of Sciences

      巻: 117 号: 40 ページ: 25150-25158

    • DOI

      10.1073/pnas.2011152117

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] シロイヌナズナの雄原細胞形成に関わるGH17メンバーの解析2021

    • 著者名/発表者名
      海老根一生,山岡尚平,上田貴志
    • 学会等名
      植物生理学会第62回年会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] 雄原細胞が栄養細胞に取り込まれるしくみ2021

    • 著者名/発表者名
      海老根一生
    • 学会等名
      植物生理学会第62回年会関連集会「植物生殖改変ワークショップ」
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] シロイヌナズナ雌性配偶体細胞における運命決定のダイナミクス2020

    • 著者名/発表者名
      栗原大輔,須崎大地,海老根一生,鈴木孝征,丸山大輔,植田美那子,東山哲也
    • 学会等名
      植物学会第84回大会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] ゼニゴケ精子変態過程におけるオルガネラ動態の解析2020

    • 著者名/発表者名
      南野尚紀,海老根一生,上田貴志
    • 学会等名
      植物学会第84回大会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] シロイヌナズナの雄原細胞形成に関わるGH17メンバーの解析2020

    • 著者名/発表者名
      海老根一生,山岡尚平,上田貴志
    • 学会等名
      植物学会第84回大会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] シロイヌナズナの生殖に対するブラシノステロイドシグナリングの効果2020

    • 著者名/発表者名
      矢野水名愛、鈴木孝征、中野雄司、海老根一生、上田貴志、東山哲也、時田公美
    • 学会等名
      植物学会第84回大会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] ゼニゴケ精子変態過程におけるオルガネラ動態の解析2019

    • 著者名/発表者名
      南野 尚紀,法月 拓也,海老根 一生,上田 貴志
    • 学会等名
      植物学会第83回大会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [学会発表] Membrane trafficking mechanisms regulating plant gametogenesis.2019

    • 著者名/発表者名
      Ebine, K., Shoda, K., Minamino, N., Uemura, T., Saito, C., Nakano, A., Ueda, T.
    • 学会等名
      Marchantia workshop 2019
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Analysis of membrane trafficking mechanism regulating male gametogenesis in Arabidopsis2019

    • 著者名/発表者名
      Ebine, K., Ueda, T
    • 学会等名
      Joint Meeting for Young Researchers on “Frontiers in Imaging Probes and Technologies”
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] シロイヌナズナの雄原細胞形成に関わるGH17メンバーの解析2019

    • 著者名/発表者名
      海老根 一生,山岡 尚平,上田 貴志
    • 学会等名
      植物生理学会第61回年会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [学会発表] ゼニゴケ精子変態期におけるオルガネラ動態と膜交通機能の解析2019

    • 著者名/発表者名
      南野 尚紀,法月 拓也,海老根 一生,上田 貴志
    • 学会等名
      植物生理学会第61回年会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [備考] 植物の発生や器官成長に重要な膜交通タンパク質のリサイクルシステムを発見

    • URL

      https://www.nibb.ac.jp/press/2020/09/22.html

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書

URL: 

公開日: 2019-04-18   更新日: 2021-12-27  

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