| 研究領域 | 高速分子動画法によるタンパク質非平衡状態構造解析と分子制御への応用 |
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| 研究課題/領域番号 |
20H05447
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| 研究種目 |
新学術領域研究(研究領域提案型)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 審査区分 |
複合領域
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
小野 純一 京都大学, 実験と理論計算科学のインタープレイによる触媒・電池の元素戦略研究拠点ユニット, 特定研究員 (30777991)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2022-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2021年度)
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| 配分額 *注記 |
6,890千円 (直接経費: 5,300千円、間接経費: 1,590千円)
2021年度: 3,510千円 (直接経費: 2,700千円、間接経費: 810千円)
2020年度: 3,380千円 (直接経費: 2,600千円、間接経費: 780千円)
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| キーワード | 高速分子動画 / 大規模量子分子動力学法 / 生体内プロトン輸送 / 光受容膜タンパク質 / 微生物型ロドプシン / バクテリオロドプシン / 自由エネルギー解析 / プロトン化状態 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
代表的な光受容膜タンパク質である微生物型ロドプシンを対象として，プロトン輸送等の機能発現機構を理論的に解明することを目的とする．本研究では，大規模量子分子動力学法を用いて，X線自由電子レーザーによって得られた分子動画の各スナップショットに脂質二重膜・水溶媒を含めた生体系全体を量子的に取り扱う．これにより，生体中におけるプロトンの動的挙動をすべて解析することが可能となり，構造変化と化学反応の双方が関与する機能発現機構の解明が実現する．本研究により，微生物型ロドプシンにおけるプロトン輸送機構が原子・電子レベルで解明されるだけでなく，膜タンパク質由来の新規材料開発に向けた設計指針の確立が期待される．
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| 研究実績の概要 |
本研究課題では，代表的な光受容膜タンパク質である微生物型ロドプシンを主対象とし，その機能発現機構を大規模量子分子動力学（MD）計算によって解明することを目指した．令和3年度には，（1）バクテリオロドプシン（BR）の2段階目のプロトン移動反応および（2）新型コロナウイルス感染症（COVID-19）の原因ウイルスSARS-CoV-2のメインプロテアーゼ（Mpro）における（基質非存在下での）プロトン化状態を対象とした理論解析を実施した．
（1）BRのM型中間体で起きる2段階目のプロトン移動は，プロトン放出基（PRG）から細胞外側水溶媒への放出過程である．M型中間体5種類の分子動画を対象とした大規模量子MD計算を実行したところ，後半3種類において，放出基出口近傍の空隙に水溶媒側から水1分子（Wat1）が進入した．その結果，PRGのGlu204からSer193とWat1を介して細胞外側水溶媒へと至る水素結合ネットワークが形成され，その経路上をリレー形式でプロトンが移動することにより2段階目のプロトン移動が進行することを明らかにした．
（2）当初の計画にはなかったが，COVID-19の感染拡大を受け，Mproを対象とした大規模量子MD計算に着手した．Mproはウイルス増殖に関わるポリタンパク質の切断反応を触媒する酵素であり，治療薬の主要な標的の一つである．活性部位において，Cys145からHis41へのプロトン移動，すなわち中性状態から双性イオン状態への遷移を起点とした触媒サイクル上で切断反応が実現する．Mproの基質フリーの結晶構造を採用し，Mpro二量体および水溶媒からなる生体分子系全体を量子的に取り扱う大規模量子MD計算を実行した．その結果，基質フリーの活性部位では双性イオン状態が最も安定であることを明らかにした．本結果は，2020年に報告された中性子結晶構造解析の結果と整合する．
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| 現在までの達成度 (段落) |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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