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Atgタンパク質とミクロリポファジーの関係

公募研究

研究領域マルチモードオートファジー:多彩な経路と選択性が織り成す自己分解系の理解
研究課題/領域番号 22H04654
研究種目

新学術領域研究(研究領域提案型)

配分区分補助金
審査区分 生物系
研究機関北海道大学 (2023)
順天堂大学 (2022)

研究代表者

辻 琢磨  北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 特任講師 (40725628)

研究期間 (年度) 2022-04-01 – 2024-03-31
研究課題ステータス 完了 (2023年度)
配分額 *注記
9,490千円 (直接経費: 7,300千円、間接経費: 2,190千円)
2023年度: 4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)
2022年度: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
キーワードミクロオートファジー / オートファジー / リポファジー / 脂肪滴 / ニーマン・ピック病C型 / ニーマンピック病C型
研究開始時の研究の概要

オートファジー関連(Atg)タンパク質を中心としたマクロオートファジーの分子機構、生理的な役割が次々に明らかになっている一方で、ミクロオートファジーについての研究は遅れ、Atgタンパク質がどのようにミクロオートファジーに関わるのかも明らかになっていない。これまでに得た結果から、マクロオートファジーが代謝制御を介してミクロオートファジーに関わっているという仮説をたてた。本研究ではこの仮説を検証し、2つの異なるオートファジーモード間の連携が液性因子により介在されているという新しい視点からミクロオートファジーの分子機構解明を目指す。

研究実績の概要

オートファジー関連(Atg)タンパク質を中心としたマクロオートファジーの分子機構が明らかになりつつある一方で、Atgタンパク質とミクロオートファジーの関係は不明なままである。我々はマクロオートファジー不全出芽酵母細胞では静止期ミクロリポファジーに必須なステロール輸送タンパク質Ncr1(液胞膜貫通タンパク質)とNpc2(液胞内腔タンパク質)が、液胞近傍のドット様構造に異常集積してしまうこと、またその原因が培地中に蓄積した代謝産物であることを見出した。興味深いことに代謝産物濃度を低下させることで速やかに異常局在は解消され、Ncr1とNpc2は正常な分布に戻った。この結果から、代謝産物濃度さえ正常であればミクロリポファジーが起こりうること、すなわちatg遺伝子欠損は代謝異常を介してミクロリポファジー不全を引き起こしているという仮説をたてた。本研究ではこの仮説を検証するとともに、マクロとミクロの異なる2つのオートファジー経路の関係を明らかにする。
本年度は培地中の代謝産物濃度に依存して静止期ミクロリポファジーが阻害されるかどうかを調べた。まず静止期ミクロリポファジーに必要な液胞膜ミクロドメイン形成が代謝産物濃度に依存しているかどうかを調べた。atg7欠損細胞を蒸留水で洗浄することで、液胞膜ミクロドメインが形成されることを確認した。次に、静止期に入る前の野生型酵母の培地に代謝産物を添加し静止期まで培養したところ、静止期ミクロオートファジーは阻害され、液胞内に脂肪滴は取り込まれなかった。この状態から代謝産物濃度の低い培地に戻し24時間培養したところ、静止期ミクロリポファジーが誘導された。同じことがatg7欠損細胞でも確認できた。これらの結果からAtgタンパク質は代謝制御を介してミクロオートファジーに関わっていることがわかった。

現在までの達成度 (段落)

令和5年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和5年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(2件)
  • 2023 実績報告書
  • 2022 実績報告書
  • 研究成果

    (9件)

すべて 2023 2022

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (6件) (うち国際学会 1件、 招待講演 6件)

  • [雑誌論文] Subcellular distribution of membrane lipids revealed by freeze-fracture electron microscopy2023

    • 著者名/発表者名
      Tsuji Takuma
    • 雑誌名

      Anatomical Science International

      巻: 99 号: 1 ページ: 1-6

    • DOI

      10.1007/s12565-023-00731-9

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Physicochemical properties of the vacuolar membrane and cellular factors determine formation of vacuolar invaginations2023

    • 著者名/発表者名
      Kimura Yoko、Tsuji Takuma、Shimizu Yosuke、Watanabe Yuki、Kimura Masafumi、Fujimoto Toyoshi、Higuchi Miyuki
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 13 号: 1 ページ: 16187-16187

    • DOI

      10.1038/s41598-023-43232-5

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] 電子顕微鏡による膜脂質分布の解析2022

    • 著者名/発表者名
      Tsuji Takuma
    • 雑誌名

      膜

      巻: 47 号: 5 ページ: 281-285

    • DOI

      10.5360/membrane.47.281

    • ISSN
      0385-1036, 1884-6440
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] ミクロオートファジーによる脂肪滴の分解2023

    • 著者名/発表者名
      辻琢磨
    • 学会等名
      第65回日本脂質生化学会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ミクロオートファジーによる脂肪滴分解とその制御機構2023

    • 著者名/発表者名
      辻琢磨
    • 学会等名
      第96回日本生化学会大会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Molecular mechanism of micro-lipophagy in budding yeast2022

    • 著者名/発表者名
      Tsuji T, Fujimoto T
    • 学会等名
      日本顕微鏡学会第78回学術講演会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 電子顕微鏡による膜脂質分布の解析2022

    • 著者名/発表者名
      辻琢磨, 藤本豊士
    • 学会等名
      日本膜学会第44年会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Molecular mechanism of micro-lipophagy in yeast2022

    • 著者名/発表者名
      Tsuji T
    • 学会等名
      72th Annual Meeting Korean Association of Anatomists
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] オルガネラ形態変化とミクロリポファジー2022

    • 著者名/発表者名
      辻琢磨
    • 学会等名
      第45回日本分子生物学会年会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演

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公開日: 2022-04-19   更新日: 2024-12-25  

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