| 研究領域 | 神経回路センサスに基づく適応機能の構築と遷移バイオメカニズム |
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| 研究課題/領域番号 |
22H05491
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| 研究種目 |
学術変革領域研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 審査区分 |
学術変革領域研究区分(Ⅲ)
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| 研究機関 | 新潟大学 |
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研究代表者 |
三國 貴康 新潟大学, 脳研究所, 教授 (90786477)
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| 研究期間 (年度) |
2022-06-16 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
9,880千円 (直接経費: 7,600千円、間接経費: 2,280千円)
2023年度: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円)
2022年度: 4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)
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| キーワード | シナプス / イメージング / 1細胞 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
経験依存的な神経回路の再編成は生後の発達、環境への適応や学習・記憶に不可欠であるが、このような再編成が「どの細胞」の「どのシナプス」で「どのような分子メカニズム」で起こっているのかは十分にわかっていない。本研究では、申請者が開発した生体脳内１細胞でのゲノム編集・分子イメージング技術、２光子ボリュームイメージング技術、および２光子蛍光寿命イメージング技術などの先端技術群と１細胞トランスクリプトーム解析技術を組み合わせることで、回路再編成が起こる細胞の分子的特徴を明らかにし、回路再編成の時間的・空間的な分子メカニズムを脳内１細胞・シナプスレベルの解像度で解明することを目指す。
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| 研究実績の概要 |
ある脳部位において経験依存的に神経回路が再編成されるとき、当該部位の全ての細胞で一様に再編成が起こるのではなく、一部の細胞でよく再編成が起こることが知られている。では、１）再編成がよく起こる細胞の特徴は何か？また、２）再編成が起こる細胞ではいつ、どこで、どのような分子が働いているのか？この問いに答えるには、まず、１細胞まるごとのレベルで再編成の程度を定量的に把握する必要がある。しかしながら、１細胞における回路再編成を定量的にモニターするのは、現在の技術では容易ではない。経験依存的に神経回路が再編成される際には、細胞レベルでは入力するシナプスのパターンが変化する。１個の神経細胞にはおよそ数千個の興奮性シナプスが樹状突起スパインに形成されており、これらスパインの構造および機能が変化することで回路は再編成される。したがって、各々のスパインの構造・機能を網羅的に同定しその経験依存的な変化をモニターできれば、１細胞まるごとでの経験依存的な神経回路の再編成を定量的に把握できる。そこで2022年度は、生体脳内１細胞での回路再編成をシナプスレベルで網羅的に観察し定量的にモニターするための技術基盤を確立することを目指した。まず、興奮性シナプス伝達の場である樹状突起スパインでの神経活動を高感度かつ高S/N比でイメージングするために、スパイン分子の内在的な発現量を変化させることなく、スパインでのカルシウム上昇を選択的かつ高感度にイメージングできるセンサーの開発を進めた。また、空間光変調器を用いて２光子励起レーザーをベッセルビーム化することで、個体の脳内を高速ボリュームイメージングできる顕微鏡のセットアップを行った。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
2022年度に予定していた技術開発は、おおむね順調に進んでいる。
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| 今後の研究の推進方策 |
2022年度に開発した生体脳内１細胞での回路再編成をシナプスレベルで網羅的に観察し定量的にモニターするための技術基盤を、2023年度はさらにブラッシュアップする。そのうえで、脳内1細胞での大規模シナプス活動イメージングを行い、さらにSLENDR/vSLENDR法や2光子蛍光寿命イメージング法を駆使して分子動態イメージングをを行う。これらの実験により、回路再編成時のスパイン特性を定量的に評価し、回路再編成の分子メカニズムを脳内１細胞・シナプスレベルの解像度で明らかにすることを目指す。
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