| 研究領域 | 植物メリステムと器官の発生を支える情報統御系 |
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| 研究課題/領域番号 |
23012028
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| 研究種目 |
特定領域研究
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 審査区分 |
生物系
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| 研究機関 | 奈良先端科学技術大学院大学 |
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研究代表者 |
橋本 隆 奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 教授 (80180826)
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| 研究分担者 |
加藤 壮英 奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 助教 (70379535)
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| 研究期間 (年度) |
2011 – 2012
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| 研究課題ステータス |
完了 (2012年度)
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| 配分額 *注記 |
6,600千円 (直接経費: 6,600千円)
2012年度: 3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
2011年度: 3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
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| キーワード | アラビドプシス / 微小管 / リン酸化 / セルロース / 蛍光プローブ / ストレス応答 / イメージング / 蛍光標識 |
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| 研究概要 |
Propyzamide-Hypersensiteive 1(PHS1)はMAPKフォスファターゼに分類される脱リン酸化酵素であり、そのN末端の推定MAPK相互作用モチーフのミスセンス変異アラビドプシス植物体は微小管重合阻害剤(propyzamide)に対して高感受性を示し、表層微小管が不安定となる。前年度では、PHSIは脱リン酸化酵素ドメイン以外に、非典型的なキナーゼドメインを持ち、自己リン酸化とαチューブリンのリン酸化を引き起こすこと、PHS1の脱リン酸化酵素ドメインを削除したり、脱リン酸化活性に必須なアミノ酸を変異させたPHS1をアラビドプシス細胞で発現させると、表層微小管が速やかに脱重合されることを報告した。本年度は、植物体を高塩濃度や高浸透圧条件化におくと、PHSIを介したαチューブリンのリン酸化が起こり、表層微小管の脱重合が迅速に引き起こされることを見出した。すなわち、PHS1を介したリン酸化シグナル伝達系が植物細胞の迅速な物理的ストレス応答に係っていることが推測される。
また、前年度にカビのセルロース結合ドメインにmCherry又はTagRFPなどの蛍光タンパク質を融合させ、エクスパンシンのシグナルペプチドを用いてアラビドプシス細胞やタマネギ表皮細胞の細胞壁に分泌させたところ、細胞壁で蛍光が観察されたが、セルロース様のポリマーへの局在は観察されなかった。本年度は、細胞膜に局在化させるような改良セルロース蛍光標識プローブをデザインし、植物細胞で発現させるようなベクターを構築中である。
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