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高等植物の表皮分化機構の確立と維持に関わる転写因子の解析

公募研究

研究領域植物メリステムと器官の発生を支える情報統御系
研究課題/領域番号 23012032
研究種目

特定領域研究

配分区分補助金
審査区分 生物系
研究機関岡山大学

研究代表者

高橋 卓  岡山大学, 大学院・自然科学研究科, 教授 (20271710)

研究分担者 本瀬 宏康  岡山大学, 大学院・自然科学研究科, 助教 (70342863)
研究期間 (年度) 2011 – 2012
研究課題ステータス 完了 (2012年度)
配分額 *注記
6,400千円 (直接経費: 6,400千円)
2012年度: 3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
2011年度: 3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
キーワードシロイヌナズナ / 表皮細胞 / 発生・分化 / 突然変異 / 分子遺伝学 / 遺伝子発現
研究概要

植物のからだ作りにおいて,表皮細胞分化は不可欠である。シロイヌナズナでは,地上部表皮の幹細胞,すなわち茎頂L1層に特異的な遺伝子発現に転写因子PDF2,ATML1が関わり,これらが表皮細胞分化において中心的なはたらきを担う。PDF2,ATML1は,標的遺伝子の調節領域にあるL1ボックス配列に結合して,その発現を正に制御しているが,自身の調節領域にもL1ボックスが存在することから,正の自己制御が予想される。本研究では,胚発生過程において,PDF2,ATML1遺伝子の発現がどのようにL1層に限定されて自己制御が確立するか,その分子基盤を明らかにすることを目標とした。
PDF2が胚のL1層より内側の細胞では他の因子と相互作用して機能できなくなる可能性を考えて,PDF2と相互作用する因子を酵母2ハイブリッド法により探索した結果,RNA結合タンパクとE3ユビキチンリガーゼが2種類ずつ,BAHタンパク,機能不明タンパクが得られた。これらは,同じHD-ZIP IVファミリーに属するHDG2とも相互作用する一方,HD-ZIP IIIファミリーのCNAとは相互作用が認められなかった。PDF2タンパクのどの領域と相互作用するか調べた結果,START領域のC末端側からSAD領域にかけて結合部位があると予想された。
一方,表皮が欠損するpdf2-1 atml1-1二重変異株を用いたマイクmアレイの結果に基づき,転写因子に絞って遺伝子発現解析を行い,表皮に特異的に発現する転写因子として,Znフィンガーを持つタンパク質を新たに見出した。プロモーター=GUS遺伝子の発現から表皮に特異的な発現が確認され,この遺伝子をPDF3と名付けた。さらに,PDF3と非常に相同性の高い遺伝子PDF31と二重欠損変異を作出した結果,胚致死になった。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

PDF2タンパク質について,相互作用する可能性のあるタンパク質の解析が進む一方,表皮細胞で特異的に機能する新たな転写因子を見つけることができ,今後の研究展開につながる重要な手がかりが得られたと判断される。

今後の研究の推進方策

当初の目的であるPDF2,ATML1の発現の開始とL1層への限定の分子機構は未だ明らかでない。PDF2プロモーターに結合する因子は,転写因子ライブラリーを用いたY1H実験により探索を続ける。また,ZIP IVファミリーの遺伝子間のヒエラルキーを明らかにするとともに,Y2H法で単離した相互作用タンパク質の解析(BiFCを用いた植物細胞での相互作用や遺伝子欠損変異株の解析)をすすめる。新たに見つけた転写因子PDF3,PDF3Lについても,機能解析に迫る。

報告書

(2件)
  • 2012 実績報告書
  • 2011 実績報告書
  • 研究成果

    (14件)

すべて 2012 2011

すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 5件) 学会発表 (9件)

  • [雑誌論文] Thermospermine is not a minor polyamine in the plant kingdom2012

    • 著者名/発表者名
      A. Takano, J.-I. Kakehi and T. Takahashi
    • 雑誌名

      Plant Cell Physiol

      巻: 53 号: 4 ページ: 606-616

    • DOI

      10.1093/pcp/pcs019

    • NAID

      10030652956

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] A chemical biology approach reveals an opposite action between thermospermine and auxin in xylem development in Arabidopsis thaliana2012

    • 著者名/発表者名
      K. Yoshimoto, Y. Noutoshi, K. Hayashi, K. Shirasu, T. Takahashi and H. Motose
    • 雑誌名

      Plant Cell Physiol

      巻: 53 号: 4 ページ: 635-645

    • DOI

      10.1093/pcp/pcs017

    • NAID

      10030653224

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Thermospermine suppresses auxin-inducible xylem differentiation in Arabidopsis thaliana2012

    • 著者名/発表者名
      K. Yoshimoto, Y. Noutoshi, K. Hayashi, K. Shirasu, T. Takahashi and H. Motose
    • 雑誌名

      Plant Signal Behav.

      巻: 7 号: 8 ページ: 937-939

    • DOI

      10.4161/psb.20784

    • NAID

      120004920209

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] NIMA-related kinases 6, 4, and 5 interact with each other to regulate microtubule organization during epidermal cell expansion in Arabidopsis thaliana2011

    • 著者名/発表者名
      H. Motose, T. Hamada, K. Yoshimoto, T. Murata, M. Hasebe, Y. Watanabe, T. Hashimoto, T. Sakai, and T. Takahashi
    • 雑誌名

      Plant J

      巻: 67 号: 6 ページ: 993-1005

    • DOI

      10.1111/j.1365-313x.2011.04652.x

    • NAID

      120004897844

    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Key Proliferative Activity in the Junction between the Leaf Blade and Leaf Petiole of Arabidopsis^<1[W][OA]>2011

    • 著者名/発表者名
      Ichihashi, Y.
    • 雑誌名

      Plant Physiology

      巻: 157 号: 3 ページ: 1151-1162

    • DOI

      10.1104/pp.111.185066

    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] シロイヌナズナSAC51遺伝子のサーモスペルミンによる翻訳促進2012

    • 著者名/発表者名
      石塚壮一
    • 学会等名
      日本植物学会第76回大会
    • 発表場所
      姫路
    • 年月日
      2012-09-15
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] 植物界におけるサーモスペルミンの分布2012

    • 著者名/発表者名
      高野綾香
    • 学会等名
      日本植物学会第76回大会
    • 発表場所
      姫路
    • 年月日
      2012-09-15
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] The SAC51 mRNA is stabilized by thermospermine and mutations of ribosomal proteins2012

    • 著者名/発表者名
      Kakehi, et al.
    • 学会等名
      23rd International Conference on Arabidopsis Research
    • 発表場所
      Vienna, Austria
    • 年月日
      2012-07-04
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] Isolation of polyamine-resistant mutants of Arabidopsis thaliana2012

    • 著者名/発表者名
      Wurina, et al.
    • 学会等名
      23rd International Conference on Arabidopsis Research
    • 発表場所
      Vienna, Austria
    • 年月日
      2012-07-04
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] A chemical-biology approach reveals a counteraction of thermospermine to auxin in xylem formation in Arabido psis thaliana2012

    • 著者名/発表者名
      Yoshimoto, et al.
    • 学会等名
      23rd International Conference on Arabidopsis Research
    • 発表場所
      Vienna, Austria
    • 年月日
      2012-07-04
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] シロイヌナズナの表皮欠損変異pdf2-1 atml1-1の最外層細胞の同一性2012

    • 著者名/発表者名
      山田雄介
    • 学会等名
      第53回日本植物生理学会年会
    • 発表場所
      京都産業大学
    • 年月日
      2012-03-18
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] シロイヌナズナの表皮分化に関わる転写因子PDF2の機能欠損変異pdf2-2の解析2012

    • 著者名/発表者名
      小川枝里子
    • 学会等名
      第53回日本植物生理学会年会
    • 発表場所
      京都産業大学
    • 年月日
      2012-03-16
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] シロイヌナズナHD-ZIP class IV遺伝子の多重変異体に見られる器官形態異常2011

    • 著者名/発表者名
      鎌田直子
    • 学会等名
      日本植物学会第75回大会
    • 発表場所
      東京大学駒場キャンパス
    • 年月日
      2011-09-19
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] NIMA-related Kinases Redundantly Regulate Directional Cell Expansion in Arabidopsis thaliana2011

    • 著者名/発表者名
      Motose, et al
    • 学会等名
      22nd International Conference on Arabidopsis Research
    • 発表場所
      Madison, WI, USA
    • 年月日
      2011-06-23
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書

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公開日: 2011-04-06   更新日: 2019-07-29  

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