腹膜播種におけるがんと腹膜との相互作用

• 研究領域: がん微小環境ネットワークの統合的研究
• 研究課題/領域番号: 23112524
• 研究種目: 新学術領域研究(研究領域提案型)
• 配分区分: 補助金
• 審査区分: 生物系
• 研究機関: 独立行政法人国立がん研究センター
• 研究代表者: 堺 隆一 独立行政法人国立がん研究センター, 研究所, 分野長 (40215603)
• 研究期間 (年度): 2011-04-01 – 2013-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 8,580千円 (直接経費: 6,600千円、間接経費: 1,980千円); 2012年度: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2011年度: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
• キーワード: スキルス胃癌 / 間質線維芽細胞 / MET / Src / チロシンキナーゼ / リン酸化 / 浸潤 / 腹膜播種 / スキルス胃がん / がん浸潤 / 細胞外基質 / 共培養

研究実績の概要

スキルス胃癌細胞44As3の播種性浸潤における腫瘍細胞と間質線維芽細胞の相互作用について解析を行った。44As3細胞と間質線維芽細胞を３次元マトリゲル上で共培養すると、両細胞からなる特徴的な浸潤性の細胞凝集塊が形成された。この細胞凝集塊においてSFは浸潤先端を含む中心部に、44As3細胞はその周りに存在していた。この細胞外基質リモデリングの機構をより詳細に解析するため、蛍光ゼラチンでコートしたカバーガラス上で両細胞を共培養した。その結果、間質線維芽細胞はゼラチンマトリックスの破壊を軽度に起こすが、44As3細胞との共培養によりこの活性が顕著に促進されることが明らかになった。一方、44As3細胞のみの培養ではゼラチンマトリックスに変化は認められなかった。また、間質線維芽細胞の収縮能を阻害するミオシン阻害剤で処理すると、両細胞によるゼラチンの破壊や３次元マトリゲルの浸潤が抑制された。同様にSrcキナーゼの阻害剤もこのような細胞外基質のリモデリングを阻害した。以上の結果から、スキルス胃癌細胞は、線維芽細胞との相互作用により細胞外基質の物理的なリモデリングを行い、これが浸潤性に寄与することが示唆された。これをイメージングにより定量化し、マルチウェルプレートを用いてがん特支援班から供与された阻害剤ライブラリのスクリーニングを行った。Src経路、Rho経路などいくつかのシグナル経路の阻害剤が異なった形で胃がん細胞とSFとの相互作用に影響をあたえることがわかった。Src阻害剤についてはマウスの腹膜播種モデルにおいて腹膜播種巣の形成を阻害し、形成された播種巣の組織像では間質線維芽細胞の腫瘍組織への侵入が阻害されている像が観察された。

現在までの達成度 (段落)

24年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

24年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] CDCP1 regulates the function of MT1-MMP and invadopodia-mediated invasion of cancer cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Miyazawa Yuri
  • 雑誌名: Mol. Cancer Res. 巻: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Suppression of autophagy by CUB domain-containing protein 1 signaling is essential for anchorage-independent survival of lung cancer cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Uekita T, Fujii S, Miyazawa Y, Hashiguchi A, Abe H, Sakamoto M, Sakai R.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 巻: 104 号: 7 ページ: 865-870
  • DOI: 10.1111/cas.12154
  • 査読あり
• [雑誌論文] ARAP3 inhibits peritoneal dissemination of scirrhous gastric carcinoma cells by regulating cell adhesion and invasion (2011)
  • 著者名/発表者名: Yagi R., Tanaka M., et al.
  • 雑誌名: Oncogene 巻: 30 号: 12 ページ: 1413-1421
  • DOI: 10.1038/onc.2010.522
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cancer susceptibility polymorphism of p53 at codon 72 affects phosphorylation and degradation of p53 protein (2011)
  • 著者名/発表者名: Ozeki C, Sawai y Shibata T, Kohno T, Okamoto K, Yokota J, Tashiro F, Tanuma S, Sakai R, Kawase T, Kitabayashi I, Taya Y, Ohki R
  • 雑誌名: J Biol Chem. 巻: 286 ページ: 18251-18260
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phosphoinositide 3-kinase signaling pathway mediated by p110α regulates invadopodia formation (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi H, Yoshida S, Muroi E, Yoshida N, Kawamura M, Kouchi Z, Nakamura Y, Sakai R, Fukami K
  • 雑誌名: J.Cell Biol. 巻: 193 号: 7 ページ: 1275-1288
  • DOI: 10.1083/jcb.201009126
  • 査読あり
• [雑誌論文] Roles of CUB domain-containing protein 1 signaling in cancer invasion and metastasis (2011)
  • 著者名/発表者名: Uekita T. and Sakai R
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 102 号: 11 ページ: 1943-1948
  • DOI: 10.1111/j.1349-7006.2011.02052.x
  • NAID: 10030244592
  • 査読あり
• [学会発表] Oncogenic Ras-ERK signaling requires activation of CDCP1 pathway for promotion of tumor metastasis (2013)
  • 著者名/発表者名: 堺 隆一
  • 学会等名: 9th AACR-JCA Joint Conference
  • 発表場所: Maui, USA
  • 年月日: 2013-02-23
• [学会発表] Differential sensitivities to molecular target drugs in scirrhous gastric carcinoma cell lines (2013)
  • 著者名/発表者名: 山口英樹
  • 学会等名: 9th AACR-JCA Joint Conference
  • 発表場所: Maui, USA
  • 年月日: 2013-02-23
• [学会発表] スキルス胃癌のシグナル異常の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 堺 隆一
  • 学会等名: 第８５回日本胃癌学会総会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2013-02-01
  • 招待講演
• [学会発表] 新規ALK結合分子であるFlotillin-1はendocytosisを介してALKシグナルを制御する。 (2012)
  • 著者名/発表者名: 富山新太
  • 学会等名: 第70回日本癌学会総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2012-09-21
• [学会発表] Ras-ERKシグナルによる癌の転移能亢進はCDCP1発現誘導を介する (2012)
  • 著者名/発表者名: 上北尚正
  • 学会等名: 第70回日本癌学会総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2012-09-20
• [学会発表] 神経芽腫におけるALKによるRETタンパク質発現制御の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 二見仁康
  • 学会等名: 第70回日本癌学会総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2012-09-19
• [学会発表] スキルス胃癌細胞株におけるc-Met受容体型チロシンキナーゼ依存性の検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山口英樹
  • 学会等名: 第70回日本癌学会総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2012-09-19
• [学会発表] スキルス胃がん細胞の胃癌由来線維芽細胞を介した細胞外基質リモデリングと浸潤 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山口英樹
  • 学会等名: 日本がん転移学会学術集会・総会
  • 発表場所: 浜松
  • 年月日: 2012-07-01
• [学会発表] CDCP1 links Ras and Src signaling pathways as a common effecter for the promotion of tumor metastasis (2012)
  • 著者名/発表者名: 堺 隆一
  • 学会等名: AACR Annual Meeting
  • 発表場所: Chicago, USA
  • 年月日: 2012-04-02
• [学会発表] Cancer-associated fibroblasts mediate extracellular matrix remodeling and three-dimensional invasion of scirrhous gastric carcinoma cells (2012)
  • 著者名/発表者名: 山口英樹
  • 学会等名: AACR Annual Meeting
  • 発表場所: Chicago, USA
  • 年月日: 2012-04-02
• [学会発表] Differential reqirements for the receptor tyrosine kinase c-Met in scirrhous gastric carcinoma cell lines (2012)
  • 著者名/発表者名: 吉田那智
  • 学会等名: AACR Annual Meeting
  • 発表場所: Chicago, USA
  • 年月日: 2012-04-02
• [学会発表] Differential reqirements for the receptor tyrosine kinase c-Met in scirrhous gastric carcinoma cell lines (2012)
  • 著者名/発表者名: Yoshida N, Yamaguchi H, Muroi E, Takanashi M, Fukami K, Sakai R
  • 学会等名: AACR Annual Meeting 2012
  • 発表場所: Chicago, USA
  • 年月日: 2012-04-02
• [学会発表] CDCP1 links Ras and Src signaling pathways as a common effecter for the promotion of tumor metastasis (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakai R, Uekita T
  • 学会等名: AACR Annual Meeting 2012
  • 発表場所: Chicago, USA
  • 年月日: 2012-04-02
• [学会発表] Cancer-associated fibroblasts mediate extracellular matrix remodeling and three-dimensional invasion of scirrhous gastric carcinoma cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi H, Yanagihara K, Yashiro M, Sakai R
  • 学会等名: AACR Annual Meeting 2012
  • 発表場所: Chicago, USA
  • 年月日: 2012-04-01
• [学会発表] Critical role of CDCP1 in RAS-mediated tumor progression and cell death (2011)
  • 著者名/発表者名: Sakai R
  • 学会等名: France-Japanese Symposium on Cancer Research
  • 発表場所: 東京(招待講演)
  • 年月日: 2011-11-02
• [学会発表] CDCP1によるオートファジーの抑制はがん細胞の足場非依存性増殖に重要である (2011)
  • 著者名/発表者名: 上北尚正、堺隆一
  • 学会等名: 第70回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2011-10-05
• [学会発表] 腫瘍由来線維芽細胞との共培養によるスキルス胃がん浸潤機構の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 山口英樹、柳原五吉、八代正和、堺隆一
  • 学会等名: 第70回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2011-10-03
• [学会発表] 神経芽腫のALK標的治療におけるRETシグナルの関わり (2011)
  • 著者名/発表者名: 二見仁康、堺隆一
  • 学会等名: 第70回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2011-10-03
• [学会発表] 神経芽腫におけるALKのチロシンリン酸化結合体白質群の同定とALK特異的ながん化シグナルにおける役割 (2011)
  • 著者名/発表者名: 富山新太、山口英樹、鎌田礼子、中川原章、北中千史、堺隆一
  • 学会等名: 第70回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2011-10-03
• [学会発表] CDCP1 links Ras and Src signaling pathways as a common effector for the promotion of tumor metastasis (2011)
  • 著者名/発表者名: Uekita T, Miyazawa Y, Sakai R
  • 学会等名: Japanese-German Cancer Workshop
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2011-09-18
• [学会発表] スキルス胃がん細胞の胃癌由来線維芽細胞を介した細胞外基質リモデリングと浸潤 (2011)
  • 著者名/発表者名: 山口英樹、堺隆一
  • 学会等名: 第20回日本がん転移学会学術集会・総会
  • 発表場所: 浜松
  • 年月日: 2011-08-14
• [学会発表] CDCP1 links RAS and Src signaling pathways as a common effector for the promotion of tumor metastasis (2011)
  • 著者名/発表者名: Uekita T, Sakai R
  • 学会等名: Mechanisms & Models of Cancer 2011
  • 発表場所: La Jolla, USA
  • 年月日: 2011-08-13
• [備考] 分子標的研究グループ 転移浸潤シグナル研究分野
  • URL: http://www.ncc.go.jp/jp/nccri/divisions/07grow/index.html
• [備考]
  • URL: http://www.ncc.go.jp/jp/nccri/divisions/07grow/07grow.html