| 研究領域 | 水を主役としたＡＴＰエネルギー変換 |
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| 研究課題/領域番号 |
23118717
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| 研究種目 |
新学術領域研究(研究領域提案型)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 審査区分 |
複合領域
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| 研究機関 | 大阪医科大学 |
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研究代表者 |
古池 晶 大阪医科大学, 医学部, 助教 (60392875)
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| 研究期間 (年度) |
2011-04-01 – 2013-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2012年度)
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| 配分額 *注記 |
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2012年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
2011年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
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| キーワード | 分子モーター / ATP加水分解 / 1分子計測 / 熱力学 / 生物物理 |
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| 研究実績の概要 |
ATP駆動の回転分子モーター・F1-ATPase(F1)は、1分子観察によって、ATP結合部位でのATP加水分解サイクルの素過程（ATPの結合・加水分解・分解物解離）と、回転軸角度との対応関係がほぼ明らかにされている。本研究では、その各素過程でのエネルギーの出入りを決定するために、環境（温度やATP加水分解の自由エネルギーなど）を変化させて 1分子観察を行った。環境変化の各素過程速度への影響を調べることで、各素過程の熱力学パラメーターを取得した。
１．ATP加水分解サイクルの各素過程の温度依存性： ほぼ無負荷の状態でF1の回転運動を、広範囲にわたる温度領域(4-65℃)で測定し、各素過程速度の温度依存性を得た。ATP結合角度を0°とすると、回転速度の律速過程は、高温(30－65℃)では、ATP加水分解または分解産物のリリース、低温(5－15℃)では、ADPリリースであることが示唆された。
２．ADPの存在によって影響を受ける未知の素過程： ATPとADPの濃度が等しい条件（ΔGが一定）で、ほぼ無負荷の状態でのF1の回転運動を調べた。各ATP濃度で５割程度の回転速度低下がみられ、この低下が、ATP結合角度の停止時間の増加に由来していることが分かった。ADPの存在によって、本来ATPが結合するはずのサイトにADPが緩く結合することによって、ATPの結合を妨げている可能性が高い。この素過程と低温で見られた素過程には関連がありそうである。
３．素過程への分離を容易にするモニター分子： 各素過程がさらに別の角度で起きれば、各素過程速度を求めることが容易になる。F1の回転子のN末で７個、C末で29個のアミノ酸を削除した変異体は、野生型と比較して停止角度が多いことを明らかにした。回転速度も遅すぎないため、モニター分子として活用できそうである。
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| 現在までの達成度 (段落) |
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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