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卵母細胞核小体によるヘテロクロマチン確立機構の解明

公募研究

研究領域ゲノムを支える非コードDNA領域の機能
研究課題/領域番号 24114510
研究種目

新学術領域研究(研究領域提案型)

配分区分補助金
審査区分 生物系
研究機関京都大学

研究代表者

大串 素雅子  京都大学, 白眉センター, 助教 (50437505)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2014-03-31
研究課題ステータス 完了 (2013年度)
配分額 *注記
12,220千円 (直接経費: 9,400千円、間接経費: 2,820千円)
2013年度: 6,110千円 (直接経費: 4,700千円、間接経費: 1,410千円)
2012年度: 6,110千円 (直接経費: 4,700千円、間接経費: 1,410千円)
キーワード核小体 / 卵母細胞 / ヘテロクロマチン / 哺乳類 / 生殖細胞 / クロマチン
研究概要

核小体はタンパク質合成を担うリボソームの構築を行う細胞小器官として古くから知られているが近年それ以外の機能も示唆されており核小体に含まれる成分・役割に関して不明な点が多い。我々は卵母細胞核小体成分のない受精卵が受精後のクロマチン構築に異常を生じることから、卵母細胞核小体がクロマチン構築を制御することで染色体構造の維持、安定な伝播に関与することを示唆した。本研究では卵母細胞核小体に含まれるRNAを同定し染色体構造維持、安定な伝播に関与する因子を同定することを目的としている。
まず、顕微操作により核小体を単離しProtease, RNase, DNase溶液中に置くとDNase溶液中では核小体構造に変化はなかったがProtease, RNase溶液中ではすぐその構造が消失した。つまり卵母細胞核小体構造にはタンパク質とRNAが必要であることを確認した。また、一つの核小体に0.5 pgの20-200 bpに分布するsmall RNAが含まれることをBioanalyzerにより同定した。少量のマウス卵母細胞核小体からRNA seqによってRNA成分を同定することを開始し、現在RNA seq用のライブラリーを構築しsequenceを開始しようとしている。また、より高効率にゲノム編集を行えるCRISPR法を用いてノックアウト・ノックインマウスを作成することに成功した。今後は核小体中に含まれるsmall RNA成分を同定しその機能を解析していく。

現在までの達成度 (区分)
理由

25年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

25年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(2件)
  • 2013 実績報告書
  • 2012 実績報告書
  • 研究成果

    (9件)

すべて 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (4件) (うち招待講演 2件) 備考 (2件)

  • [雑誌論文] Offspring from oocytes derived from in vitro primordial germ cell-like cells in mice2012

    • 著者名/発表者名
      Hayashi, K., Ogushi, S., Kurimoto, K., Shimamoto, S., Ohta, H., Saitou, M
    • 雑誌名

      Science

      巻: 338 号: 6109 ページ: 971-975

    • DOI

      10.1126/science.1226889

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Nucleoli from two-cell embryos support the development of enucleolated germinal vesicle oocytes in the pig2012

    • 著者名/発表者名
      Kyogoku, H., Ogushi, S., Miyano, T.
    • 雑誌名

      Biology of Reproduction

      巻: 87 号: 5 ページ: 1131-6

    • DOI

      10.1095/biolreprod.112.103119

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Effects of proteasome inhibitors on the nucleolar size of porcine oocytes.2012

    • 著者名/発表者名
      Jitsukawa M, Kyogoku H, Ogushi S, Miyano T.
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development

      巻: 58 ページ: 162-166

    • NAID

      10030407716

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] The maternal nucleolus controls the chromatin organization at the zygote's first cell cycle2013

    • 著者名/発表者名
      Sugako OGUSHI
    • 学会等名
      World Class University, Biomodulation Symposium "From Germplasm to Cloning"
    • 発表場所
      Seoul National University, Seoul, Korea
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] “Nucleoplasmin2 in the maternal nucleolus is the critical factor for the higher-chromatin organization after fertilization.”2012

    • 著者名/発表者名
      Ogushi S, Yamagata K, Wakayama T, Saitou M.
    • 学会等名
      The 35th Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan, Workshop “Egg-Cell Biology with Cutting-Edge Technologies”
    • 発表場所
      Fukuoka, JAPAN
    • 年月日
      2012-12-13
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Maternal nucleolus governs the higher chromatin organization after fertilization.2012

    • 著者名/発表者名
      Ogushi S, Yamagata K, Wakayama T, Saitou M.
    • 学会等名
      SRD-NIAS the 2nd Japan-Czech Joint Symposium “Understanding the Germ Cell Potential”
    • 発表場所
      Tokyo, JAPAN
    • 年月日
      2012-09-10
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] Production of fertile gametes from mouse pluripotent stem cells.2012

    • 著者名/発表者名
      Hayashi K, Ogushi S, Shimamoto S, Saitou M.
    • 学会等名
      SRD-NIAS the 2nd Japan-Czech Joint Symposium “Understanding the Germ Cell Potential”
    • 発表場所
      Tokyo, JAPAN
    • 年月日
      2012-09-10
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [備考] SRD Young Investigation Award

    • URL

      http://reproduction.jp/NewHP/SRDAward/2013.html

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [備考] 共同研究成果:体外培養にて得られた始原生殖細胞に由来する卵子からのマウス産出に成功しました

    • URL

      http://www.hakubi.kyoto-u.ac.jp/02_mem/sei.html

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書

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公開日: 2013-05-15   更新日: 2019-07-29  

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