公募研究
新学術領域研究(研究領域提案型)
１）(In-situ光照射固体ＮＭＲシステムの構築) これまでに開発してきた光照射固体ＮＭＲ装置の光照射効率を格段に上げることを試みた。同時にＬＥＤ光源から複数の波長での光照射を可能にした。２)(ppR-pHtrII複合体における光中間体の捕捉と光反応サイクルの解明) 負の光走性を示すppR-pHtrII複合体は光信号を伝達するM-中間体の寿命が1.7秒と他の中間体に比べて格段に長いことから、in-situ光照射固体ＮＭＲにおいて、520 nmの光を照射することで、標識した[13C-20]retinalのＮＭＲ信号を観測し、M-中間体の捕捉を確認することが出来た。その結果、M-中間体には少なくとも３種類の区別できる中間体が共存していることが明らかになった。次にM-中間体が捕捉された状態で365 nmの青色光を照射した。この結果、３種類の中間体の内１つは紫外線光活性のないことが分かったのでこの中間体がM-中間体ではなくN-中間体であることが判明した。３）(SRIにおける光中間体の捕捉と光反応サイクルの解明) SrSRI(Salinibacter ruber sensaryrhodopsin I)は真正細菌由来のロドプシンであり、正と負の両方の光走性機能をもつ光受容膜タンパク質である。光を照射することにより、K,L,M-中間体を経て元に戻る光反応回路に加えて、２光子吸収により、M-からP-中間体を経て元に戻る光反応過程が存在する。SrSRIは大腸菌発現系で発現し、ＰＧ膜に再構成して測定試料とした。光照射固体ＮＭＲの測定はＬＥＤから発生した２波長の光（365 nm, 520 nm）を照射した条件で固体CP-MAS-NMRスペクトルを観測した。この結果、520 nmの光照射でM-中間体が、365 nmの光照射でP-中間体が捕捉され、波長に依存して中間体が入れ替わる現象を観測した
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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すべて 雑誌論文 (12件) (うち査読あり 12件) 学会発表 (19件) (うち招待講演 8件) 図書 (1件) 備考 (1件)
Angew. Chem. Int. Ed.
巻: (印刷中) 号: 27 ページ: 7080-7084
10.1002/ange.201309258
Phys. Chem. Chem. Phys.
巻: 15 号: 11 ページ: 3946-3954
10.1039/c3cp44592e
巻: 15 号: 23 ページ: 8890-8901
10.1039/c3cp44544e
巻: 15 ページ: 13523-13531
巻: 15 号: 39 ページ: 16956-16964
10.1039/c3cp52810c
巻: -
J. Mol. Biol.
巻: 416 号: 1 ページ: 108-120
10.1016/j.jmb.2011.12.023
FEMS Yeast Res
巻: 12 号: 4 ページ: 415-422
10.1111/j.1567-1364.2012.00788.x
Biophys. J.
巻: 103 ページ: 1735-1743
Polymer Journal
巻: 44 号: 8 ページ: 863-867
10.1038/pj.2012.116
10030931693
Biochemistry
巻: 51 号: 51 ページ: 10167-10174
10.1021/bi3012274
Journal of Physical Chemistry C
巻: 116 号: 48 ページ: 25293-25299
10.1021/jp305359q
http://www.chem.ynu.ac.jp/lab/naitolab/
