公募研究
新学術領域研究(研究領域提案型)
本計画は独自に開発した大腸上皮細胞の初代培養系を応用し癌化モデルによる正常幹細胞由来癌幹細胞の形成を空間的・経時的に解析することで癌幹細胞の特異性、機能維持機構を解明することを目的とする。本年度は、マウス由来大腸上皮の初代培養を行い、in vitroにおける炎症発がんモデルを確立するため、初代培養細胞にAOM処理を行い、さらに種々のサイトカインにて刺激するなど条件検討を行った。幹細胞可視化に関しては、レンチウイルスを用いて蛍光タンパクであるmCherryを初代培養細胞に導入することにより、１幹細胞の可視化に成功した。小腸初代培養細胞においてTLR5は基底側に限局して発現しており、フラジェリン添加によりサイトカインを産生することが明らかとなった。NFkB p65の免疫染色によりNFkBシグナルが作動する細胞を同定し、幹細胞も炎症刺激によりシグナルが作動することを明らかとした。また炎症発がんの特徴である粘液産生がんに着目し、粘液産生に寄与するAtoh1蛋白の機能解析を行い、粘液産生のみならずがん幹細胞性質、抗がん剤耐性機構まで関与することを明らかとし、TNFαがAtoh1蛋白を安定化させることにより、粘液形質を獲得することを発見した。炎症性腸疾患患者のがん部と非がん部の免疫染色を行い、炎症発がんではAtoh1が発現し粘液形質を維持することを明らかとした。以上の成果は当初の研究計画をおおむね順調に遂行しており、ヒト大腸初代培養の確立および幹細胞可視化への条件検討は炎症発がんのモデルだけでなく、種々の病態、疾患予測に有用であると期待される。
26年度が最終年度であるため、記入しない。
すべて 2015 2014 2013
すべて 雑誌論文 (11件) (うち査読あり 9件、 オープンアクセス 5件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (14件) (うち招待講演 6件)
Cancer Res.
巻: 75 号: 4 ページ: 766-776
10.1158/0008-5472.can-14-2036
120005593962
Genes Immun.
巻: 16 号: 1 ページ: 54-56
10.1038/gene.2014.61
Biochem Biophys Res Commun
巻: 454 号: 4 ページ: 493-499
10.1016/j.bbrc.2014.10.091
巻: 456(1) 号: 1 ページ: 298-304
10.1016/j.bbrc.2014.11.075
PeerJ
巻: 2 ページ: e370-e370
10.7717/peerj.370
巻: 443 号: 3 ページ: 840-846
10.1016/j.bbrc.2013.12.061
PloS One.
巻: 8 号: 11 ページ: e79693-e79693
10.1371/journal.pone.0079693
Immunol Lett.
巻: 156 号: 1-2 ページ: 82-93
10.1016/j.imlet.2013.09.001
120005468269
J Immunol.
巻: 190 号: 12 ページ: 6616-6625
10.4049/jimmunol.1202930
日本内科学会雑誌
巻: 102 ページ: 25-31
巻: 102 ページ: 2273-2278
10031202663
