チェックポイントとリン酸化抗体

2009 年度 自己評価報告書

• 研究領域: 細胞周期フロンティア-増殖と分化相関
• 研究課題/領域番号: 19057010
• 研究種目: 特定領域研究
• 配分区分: 補助金
• 審査区分: 生物系
• 研究機関: 愛知県がんセンター(研究所)
• 研究代表者: 稲垣 昌樹 愛知県がんセンター(研究所), 発がん制御研究部, 部長 (30183007)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2011
• キーワード: 細胞周期 / 細胞分裂 / チェックポイント / 細胞構築

研究概要

(1) 紫外線によるDNA障害およびDNA複製阻害回復期及び細胞周期のG2期から分裂前期において生じるChk1のセリン286・301のリン酸化反応を遂行するプロテインキナーゼの同定:DNA-PK, JNK, Cdk2, Cdk1などの候補となるキナーゼが同部位をinvitroでリン酸化しうるかについて検討を行う。次に、それぞれに特異的な阻害剤やsiRNAを用いて標的キナーゼの活性を抑制した際に、セリン286・301のリン酸化反応が減弱するかについて検討を加える。
(2) Chk1のセリン286・301や他の新規同定リン酸化部位のリン酸化反応の生理的意義の解明:次に、Chk1のセリン286・301や新規同定リン酸化部位のリン酸化反応がどのようなChk1の機能変化を引き起こしているかについて検討を加える。
(3) 新規細胞周期チェックポイント機構の普遍性の証明とその分子基盤の解明:分裂酵母を用いて明らかにしてきたmRNA品質チェックポイントが哺乳動物細胞においても存在することを確認し、この機構に関与する因子について遺伝学的手法を用いて網羅的に同定する。また、哺乳動物細胞において、Chk1欠失により誘導されたヒストン代謝異常が細胞周期S 期停止を引き起こすことが明らかとなったので、この分子基盤を明らかにし、ヒストン代謝と染色体安定化維持との生理学的関連を解明する。

研究成果

• [雑誌論文] Novel positive feedback loop between Cdk1 and Chk1 in the nucleus during the G2/M transition. (2009)
  • 著者名/発表者名: Enomoto, M., Goto, H., Tomono, Y., Kasahara, K., Tsujimura, K., Kiyono, T., Inagaki, M.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 284 ページ: 34223-34230
  • 査読あり
• [雑誌論文] The keratin-binding protein Albatross regulates polarization of epithelial cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Sugimoto, M., Inoko, A., Shiromizu, T., Nakayama, M., Zou, P., Yonemura, S., Hayashi, Y., Izawa, I., Sasoh, M., Uji, Y., Kaibuchi, K., Kiyono, T., Inagaki, M.
  • 雑誌名: J.CellBiol. 183 ページ: 19-28
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of a site- and phosphorylation state-specific antibody. (2007)
  • 著者名/発表者名: Goto, H., Inagaki, M.
  • 雑誌名: Nat.Protoc. 2 ページ: 2574-2581
  • 査読あり
• [雑誌論文] 14-3-3γ mediates Cdc25A proteolysis to induce S and G2 arrest after DNA damage.
  • 著者名/発表者名: Kasahara, K., Goto, H., Enomoto, M., Tomono, Y., Kiyono, T., Inagaki, M.
  • 雑誌名: EMBO J. (in press)
  • 査読あり
• [学会発表] Anti-phospho peptide antibodies - a tool to address the regulatory function of intermediate filaments and cell cycle progression in astrocytes. (2009)
  • 著者名/発表者名: Inagaki, M.
  • 学会等名: the 6th European Conference on Intermediate Filaments (Nanofilaments) in Health and Disease
  • 発表場所: Sweden
  • 年月日: 20090000