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研究代表者らによるA型精原細胞(A-SG)とB型精原細胞(B-SG)を個別に移植を行った実験から、A-SGの中には幹細胞能をもつ精原幹細胞が含まれており、分化した細胞はすでに幹細胞能を失っていることが明らかとなっている。一方、近年いくつかの組織幹細胞において、ヘキスト染色を施したのち、ヘキストグリーンとヘキストレッドでフローサイトメーター解析した個々の細胞を、ヒストグラム上に2次元展開すると、幹細胞能を保持する細胞集団はside population(SP)として検出できることが報告されている。そこで、今年度はニジマスの精原幹細胞を検出するための方策として、vasa-Gfp遺伝子導入ニジマスの精巣細胞を材料に用い、得られた精巣細胞をヘキスト染色した後、GFP陽性の細胞集団を上記のフローサイトメーター解析に供し、個々の細胞の分布を調査した。その結果、ニジマス精巣には明瞭にSP集団が存在することが明らかとなった。同様の解析を精巣細胞全集団に対して行った結果、SPにはGFP強陽性の未分化と考えられる生殖細胞のみが濃縮されていることが明らかとなった。また、得られたSPに属する細胞とその他の細胞を孵化稚魚の腹腔内へと移植した結果、SPに属する細胞は、その他の細胞と比較し、明瞭に移植効率が高いことが明らかとなった。以上の結果から、ニジマス精巣細胞のSPには高い移植能を保持した精原幹細胞が濃縮されている可能性が示唆された。現在、得られた細胞集団の形態を詳細に解析中である。
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