生物個体は、時間とともに複雑化し、異質性の高い(ヘテロジニアスな)細胞集団へと変化していく。このような時間軸をともなう組織の変遷過程を理解するには、生きた生物個体における複数の生体分子の同時イメージングが必須である。しかし、蛍光を用いたイメージングでは、最大4色程度までしか観察が出来ない。本研究では、領域内にて開発される新規ラマンプローブを用いた多重イメージングの生体応用を行う。ショウジョウバエの時期部位特異的な高度遺伝学を利用し、in vivoでの多重酵素活性イメージング、全オルガネラ同時ライブイメージング、超解像イメージング技術を確立する。さらに、個体の発生、ガン化、老化過程における複雑化動態を解明し、本技術の生体応用における汎用性・革新性を実証する。最終年度は、領域内共同研究として、ショウジョウバエ組織を用いたラマンイメージングを多数行い、技術開発を継続して行なった。重水素メチオニン取り込みによるタンパク質翻訳量を可視化するイメージング技術を確立でき、論文として発表した。また、細胞内滞留型のラマンプローブを、ショウジョウバエ遺伝学を応用し実証実験を行なった。組織内の酵素反応を染め分けることが認められ、論文として発表した。また、老化個体、あるいは老化過程を模した状態のショウジョウバエについて、ラマンプローブと同様の原理を持つ蛍光プローブの染色を行い、その染色パターンに乱れが見られる様子を観察することが出来た。
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