| 研究概要 |
DNA複製フォーク停止の修復に大変重要なタンパク質因子Hef/FancMのN-末側ヘリカーゼ用ドメインとC-末側ヌクレアーゼ用ドメインの間に存在する領域が本当に天然変性状態であることを、NMR,CD,高速AFM観察の手法を用いて調べた。さらに、この部分にPCNAが結合すること、そして、実際に結合する部位を同定した。同時にこの領域と相互作用するタンパク質因子を酵母two-Hybrid法で網羅的にスクリーニングをし、候補タンパク質を選定した。これらのタンパク質間の相互作用を確認中である。
出芽酵母の減数分裂開始を制御するクロマチン関連転写因子Ume6とRmelの機能解析を進めた。Ume6は転写活性化と抑制の両方の機能を持つが、それぞれの機能発現にはN末側とC末側の異なる天然変性領域が関与していることを見出した。Rmelによる転写抑制には分子中央の天然変性領域が重要であると考えられた。一方、クロマチンとのネットワーク解明に向けて、天然変性タンパク質ヒストンから構成されるヌクレオソームの構造多様性の要因についても解析を進めた。
核小体ヒストンシャペロンNucleophosmin/B23タンパク質に関して研究を進めている。B23は天然変性状態にある酸性アミノ酸領域を介してヒストンシャペロンとして機能する。また、B23のN末端領域を介した多量体形成は、ヒストンシャペロン活性に非常に重要である。本年度はB23とそのファミリータンパク質NPM3の多量体形成がその機能発現には重要であることを明らかにした。
以上のように三つの実験系で天然変性領域が直接関与する相互作用の機能解析が進んできたので、構造解析グループと協力し合いながら、天然変性領域の相互作用様式の共通性と多様性について調べて行こうとしている。
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