造血細胞分化における染色体修飾と転写因子のクロストーク

2014 年度 実績報告書

• 研究領域: 多方向かつ段階的に進行する細胞分化における運命決定メカニズムの解明
• 研究課題/領域番号: 22118002
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 北村 俊雄 東京大学, 医科学研究所, 教授 (20282527)
• 研究分担者: 阪上 朝子 独立行政法人理化学研究所, 脳科学総合研究センター, 研究員 (90462689)
• 研究期間 (年度): 2010-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 細胞分化 / エピジェネティクス / 細胞周期

研究実績の概要

１）Hes1で不死化した細胞にC/EBPa-ERおよびPU1-ERを発現させ、タモキシフェンによる分化誘導を試みたが分化傾向が弱く生化学的な研究には向かないことが判明した。そこでATRAとvitD3でそれぞれ好中球と単球に分化するHL60細胞を利用して研究することに方針を変更し、ATRAおよびvitD3刺激後、0、１、2、3、6、12、24、48、72時間後にRNAを抽出し、RNAseqを行った。分化誘導後に発現してくる遺伝子は既知のもの以外にSema6Bなど従来は造血系分化に関係が知られていなかった分子を同定し、解析中である。
２）エピジェネテック因子ASXL1の変異は骨髄系造血器腫瘍の5-30%に認められる。中でも骨髄異形成症候群（MDS）や慢性骨髄単球性白血病（CMML）患者において高頻度に認められる。我々はASXL1変異がHoxA9/10、miR125bの脱抑制およびmiR125bによるClec5aの発現低下を介してMDS様疾患の発症を誘導することをマウスモデルにおいて示した。SETBP1変異と共存するとTGFβ経路の抑制を介して白血病に進展することも明らかにした。
３）p27変異体（p27K-）に蛍光蛋白質Venusを融合させた分子は期待通り、細胞がG0からG1に移行する際に分解され、良いG0マーカーとなった。p27K-mVenusをRosa26座にノックインしたマウスも樹立した。Vav-Creマウスと掛け合わせて解析を開始した。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] The stability of epigenetic factor ASXL1 is regulated through ubiquitination and USP7-mediated deubiquitination. (2015)
  • 著者名/発表者名: Inoue, D., Nishimura, K., Kozuka-Hata, H., Oyama, M. and Kitamura, T.
  • 雑誌名: Leukemia 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.1038/leu.2015.90.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Ceramido-CD300f binding suppresses experimental colitis by inhibiting ATP-mediated mast cell activation. (2015)
  • 著者名/発表者名: Matsukawa, T., Izawa, K., Isobe, M., Takahashi, M., Maehara, A., Yamanishi, Y., Kaitani, A., Okumura, K., Teshima, T., *Kitamura, T. and *Kitaura, J.
  • 雑誌名: Gut 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.1136/gutjnl-2014-308900
  • 査読あり
• [雑誌論文] A C-terminal mutant of CCAAT-enhancer-binding protein α (C/EBPα-Cm) downregulates Csf1r, a potent accelerator in the progression of acute myeloid leukemia with C/EBPα-Cm (2015)
  • 著者名/発表者名: Togami, K., Kitaura, J., Uchida, T., Inoue, D., Nishimura, K., Kawabata, K.C., Nagase, R., Horikawa, S., Izawa, K., Fukuyama, T., Nakahara, F., Oki, T., Harada, Y., Harada, H., Aburatani, H. and Kitamura, T.
  • 雑誌名: Exp. Hematol. 巻: 43 ページ: 300-308
  • DOI: 10.1016/j.exphem.2014.11.011
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Autoimmune susceptible HLA alleles encode unstable proteins. (2015)
  • 著者名/発表者名: Miyadera, H., Ohashi, J., Lernmark, A., Kitamura, T., and Tokunaga, K.
  • 雑誌名: J. Clin. Invest. 巻: 125 ページ: 275-291
  • DOI: 10.1172/JCI74961.
  • 査読あり
• [雑誌論文] SETBP1 mutations drive leukemic transformation in ASXL1-murtated MDS. (2014)
  • 著者名/発表者名: Inoue, D., Kitaura, J., Matsui, H., Hou, H-A, Chou, W-C, Nagamachi, A., Kawabata, K.C., Togami, K., Nagase, R., Horikawa, S., Saika, M., Micol, J-P., Hayashi, Y., Harada, Y., Harada, H., Inaba, T., Tien, H-F., Abdel-Wahab, O., and Kitamura, T.
  • 雑誌名: Leukemia 巻: 29 ページ: 847-857
  • DOI: 10.1038/leu.2014.301
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] The molecular basis of myeloid malignancies. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kitamura, T., Inoue, D., Okochi-Watanabe, N., Kato, N., Komeno, Y., Lu, Y., Enomoto, Y., Doki, N., Uchida, T., Kagiyama, Y., Togami, K., Kawabata, K.C., Nagase, R., Horikawa, S., Hayashi, Y., Saika, M., Fukuyama, T., Izawa, K., Oki, T., Nakahara, F., and Kitaura, J.
  • 雑誌名: Proceedings of Japanese Acadmy, Series B 巻: 90 ページ: 389-404
  • DOI: 10.2183/pjab.90.389
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Hes1 promotes blast crisis in chronic myelogenous leukemia through MMP-9 up-regulation in leukemic cells. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nakahara, F., Kitaura, J., Nishida, C., Uchida, T., Togami, K., Inoue, D., Matsukawa, T., Enomoto, Y., Kawabata, K.C., Chen-Yi, L., Komeno, Y., Izawa, K., Oki, T., Nagae, G., Harada, Y., Harada, H., Otsu, M., Aburatani, H., Hattori, K., and Kitamura, T.
  • 雑誌名: Blood 巻: 123 ページ: 3932-3942
  • DOI: 10.1182/blood-2013-01-476747
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Ezh2 loss promotes development of myelodysplastic syndrome but attenuates its predisposition to leukemic transformation. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sashida, G., Harada, H., Matsui, H., Oshima, M., Yui, M., Harada, Y., Tanaka, S., Mochizuki-Kashio, M., Wang, C., Saraya, A., Muto, T., Hayasi, Y., Suzuki, K., Nakajima, H., Inaba, T., Koseki, H., Huang, G., Kitamura, T. and Iwama, A.
  • 雑誌名: Nat. Commun. 巻: 5 ページ: 5177
  • DOI: 10.1038/ncomms5177
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nov/CCN regulates long term repopulation activity of murine hematopietic stem cells via integrin αvβ3. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ishihara, J., Umemoto, T., Yamato, M., Shiratsuchi, Y., Takaki, S., Petrich, B.G., Nakauchi, H., Eto, K., Kitamura, T., and Okano T.
  • 雑誌名: Int. J. Hematol. 巻: 99 ページ: 393-406
  • DOI: 10.1007/s12185-014-1534-x
  • 査読あり
• [雑誌論文] A novel cell-cycle indicator, mVenus-p27K-, identifies quiescent cells and visualizes G0-G1 transition. (2014)
  • 著者名/発表者名: Oki, T., Nishimura, K., Kitaura, J., Togami, K., Maehara, A., Izawa, K., Sakaue-Sawano. A., Niida, A., Miyano, S., Aburatani, H., Kiyonari, H., Miyawaki, A. and Kitamura, T.
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 4 ページ: 4012
  • DOI: 10.1038/srep04012
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Hes1 up-regulation contributes to the development of FIP1L1-PDGFRA-positive leukemia in blast crisis. (2014)
  • 著者名/発表者名: Uchida, T., Kitaura, J., Nakahara, F., Togami, K., Inoue, D., Maehara, A., Nishimura, K., Kawabata, C. K., Doki, N., Kakihana, K., Yoshioka, K., Izawa, K., Oki, T., Sada, A., Harada, Y., Ohashi, K., Katayama, Y., Matsui, T., Harada, H., and Kitamura, T.
  • 雑誌名: Exp. Hematol. 巻: 42 ページ: 369-379
  • DOI: 10.1016/j.exphem.2014.01.009
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Age-related epigenetic drift in the pathogenesis of MDS and AML. (2014)
  • 著者名/発表者名: Maegawa, S., Gough, S., Watanabe-Okochi, N., Lu, Y., Zhang, N., Castoro, R.J., Estecio, M.R.H., Jelinek, J., Liang, S., Kitamura, T., Aplan, P., and Issa, J.P.
  • 雑誌名: Genome Research. 巻: 24 ページ: 580-591
  • DOI: 10.1101/gr.157529.113
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sphingomyelin and ceramide are physiological ligands for human LMIR3/CD300f, inhibiting FceRI-mediated mast cell activation. (2014)
  • 著者名/発表者名: Izawa, K., Isobe, M., Matsukawa, T., Ito, S., Maehara, A., Takahashi, M., Yamanishi, Y., Kaitani, A., Oki, T., Okumura, K., *Kitamura, T., and *Kitaura, J.
  • 雑誌名: J. Allergy. Clin. Immunol. 巻: 133 ページ: 270-273
  • DOI: 10.1016/j.jaci.2013.08.008
  • 査読あり
• [雑誌論文] A promoter-level mammalian expression atlas. (2014)
  • 著者名/発表者名: Forrest, A.R.R., Kawaji, H., Rehli, M., Baillie, J.K, de Hoon, M.J.L., Haberle, V., Lassmann, T., Kulakovskiy, I.V., Lizio, M., Itoh, M., Andersson, R., Mungall, C. J.,et al.
  • 雑誌名: Nature 巻: 507 ページ: 462-470
  • DOI: 10.1038/nature13182
  • 査読あり
• [学会発表] レトロウイルスベクターを利用した高効率遺伝子導入法とその応用 (2015)
  • 著者名/発表者名: 北村俊雄
  • 学会等名: 第１４回再生医療学会 シンポジウム
  • 発表場所: 横浜・パシフィコ横浜
  • 年月日: 2015-03-21 – 2015-03-21
  • 招待講演
• [学会発表] Molecular basis by which mutations of epigenetic factors induce MDS-like symptons. (2015)
  • 著者名/発表者名: K. Kawabata, D. Inoue and T. Kitamura.
  • 学会等名: 日米造血器腫瘍
  • 発表場所: ハワイ島・米国
  • 年月日: 2015-03-16 – 2015-03-18
• [学会発表] MDS induced by ASXL1 mutations and its leukemic transformation by an additional SETBP1 mutation (2015)
  • 著者名/発表者名: D. Inoue, H. Matsui, T. Ochiya, F. Thol, M. Heuser, H-A How, W.C. Chou, J. Kitaura, R. Levine, H-F. Tien, O. Abdel-Wahab, T. Kitamura.
  • 学会等名: キーストンシンポジウム
  • 発表場所: キーストン・米国
  • 年月日: 2015-01-25 – 2015-01-30
• [学会発表] Molecular mechanisms of MDS and MDS/AML pathogenesis induced by ASXL1 and ASXL1/SETBP1 mutations. (2014)
  • 著者名/発表者名: D. Inoue, T. Kitamura.
  • 学会等名: 第４３回日本免疫学会
  • 発表場所: 京都・京都国際会館
  • 年月日: 2014-12-10 – 2014-12-12
  • 招待講演
• [学会発表] MHC-peptide interaction analysis by the cell-surface expression assay (2014)
  • 著者名/発表者名: H.Miyadera, T.Kitamura, K.Tokunaga.
  • 学会等名: 第４３回日本免疫学会
  • 発表場所: 京都・京都国際会館
  • 年月日: 2014-12-10 – 2014-12-12
• [学会発表] LMIR3/CD300f deficiency aggravates DSS-induced colitis (2014)
  • 著者名/発表者名: T.Matsukawa, K.Izawa, M.Isobe, M.Takahashi, A.Maehara, A.Kaitani, K.Okumura, T.Kitamura, J.Kitaura.
  • 学会等名: 第４３回日本免疫学会
  • 発表場所: 京都・京都国際会館
  • 年月日: 2014-12-10 – 2014-12-12
• [学会発表] Secreted small RNAs regulate “inflammatory niche” and development of tumors. (2014)
  • 著者名/発表者名: .N.Yamakawa, K.Imadome, K.Hozumi, K.Ando, T.Kitamura, A.Kotani.
  • 学会等名: 第４３回日本免疫学会
  • 発表場所: 京都・京都国際会館
  • 年月日: 2014-12-10 – 2014-12-12
• [学会発表] Disrupting ceramide-LMIR3 interaction prevents bacterial sepsis by stimulating neutrophil recruitment. (2014)
  • 著者名/発表者名: K.Izawa, M.Isobe, T.Matsukawa, A.Maehara, M.Takahashi, A.Kaitani, K.Okumura, T.Kitamura, J.Kitaura.『Disrupting ceramide-LMIR3 interaction prevents bacterial sepsis by stimulating neutrophil recruitment.
  • 学会等名: 第４３回日本免疫学会
  • 発表場所: 京都・京都国際会館
  • 年月日: 2014-12-10 – 2014-12-12
• [学会発表] SETBP1 Mutations Drive Leukemic Transformation in ASXL1-Mutated MDS (2014)
  • 著者名/発表者名: D.Inoue, H.Matsui, HA.Hou, WC.Chou, A.Nagamachi, J.Kitaura, K.Kawabata, K.Togami, R.Nagase, S.Horikawa, M.Saika, JB.Micol, Y.Hayashi, Y.Harada, HF.Tien, O.Abdel-Wahab, T.Kitamura.
  • 学会等名: The 56th American Society of Hematology annual meeting
  • 発表場所: サンフランシスコ・アメリカ
  • 年月日: 2014-12-08 – 2014-12-08
• [学会発表] MDS induced by ASXL1 mutations and its leukemic transformation by an additional SETBP1 mutation. (2014)
  • 著者名/発表者名: D. Inoue and T. Kitamura.
  • 学会等名: 日仏がんワークショップ
  • 発表場所: 京都・関西セミナーハウス
  • 年月日: 2014-11-19 – 2014-11-21
• [学会発表] 骨髄系造血器腫瘍発症の分子機構 (2014)
  • 著者名/発表者名: 北村俊雄
  • 学会等名: 第７６回日本血液学会
  • 発表場所: 大阪・大阪国際会議場
  • 年月日: 2014-10-31 – 2014-11-02
• [学会発表] C-terminal truncation type of RUNX1 mutants induce MDS/AML via gain-of-function mechanisms (2014)
  • 著者名/発表者名: H.Harada, Y.Harada, D.Inoue, Y.Ding, G.Sashida, A.Iwama, H.Nakajima, J.Tanaka, N.Komatsu, T.Kitamura.
  • 学会等名: 第７６回日本血液学会
  • 発表場所: 大阪・大阪国際会議場
  • 年月日: 2014-10-31 – 2014-11-02
• [学会発表] Dominant negative EZH2 promotes myeloid tumorigenesis in mouse BMT model. (2014)
  • 著者名/発表者名: K.Kawabata, D.Inoue, J.Kitaura, T.Kitamura.
  • 学会等名: 第７６回日本血液学会
  • 発表場所: 大阪・大阪国際会議場
  • 年月日: 2014-10-31 – 2014-11-02
• [学会発表] ETBP1 mutations drive leukemic transformation in ASXL1-mutated MDS (2014)
  • 著者名/発表者名: D.Inoue, J.Kitaura, K.Kawabata, H.Matsui, K.Togami, R.Nagase, S.Horikawa, T.Kitamura.
  • 学会等名: 第７６回日本血液学会
  • 発表場所: 大阪・大阪国際会議場
  • 年月日: 2014-10-31 – 2014-11-02
• [学会発表] ASXL1変異によるMDS・AML発症機構の解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 井上大地
  • 学会等名: 第130回小児血液腫瘍免疫懇話会
  • 発表場所: 東京・東京医科歯科大学
  • 年月日: 2014-10-17 – 2014-10-17
• [学会発表] Molecular roles of ASXL1 mutations in inducing myelodysplastic syndromes. (2014)
  • 著者名/発表者名: 北村俊雄
  • 学会等名: 日本癌学会
  • 発表場所: 横浜・パシフィコ横浜
  • 年月日: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [学会発表] SETBP1 Mutations Drive Leukemic Transformation in ASXL1-Mutated MDS. (2014)
  • 著者名/発表者名: D.Inoue.
  • 学会等名: 43rd ISEH annual meeting
  • 発表場所: モントリオール・カナダ
  • 年月日: 2014-08-23 – 2014-08-23
• [学会発表] Modeling the hematological malignancies in mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: T. Kitamura.
  • 学会等名: 43rd ISEH annual meeting
  • 発表場所: モントリオール・カナダ
  • 年月日: 2014-08-21 – 2014-08-24
  • 招待講演
• [学会発表] ASXL1変異によるMDS発症機構の解明 (2014)
  • 著者名/発表者名: 井上大地・北村俊雄
  • 学会等名: 第１０回麒麟塾
  • 発表場所: 東京 コクヨホール
  • 年月日: 2014-07-10 – 2014-07-10
• [学会発表] C-terminal-truncating ASXL1 mutations induce MDS via repression of PRC2 function (2014)
  • 著者名/発表者名: 井上大地・北村俊雄
  • 学会等名: 平成26年度医科学研究所研究成果発表会
  • 発表場所: 東京・東京大学医科学研究所
  • 年月日: 2014-05-31 – 2014-05-31
• [学会発表] MDS induced by ASXL1 mutations and its leukemic transformation by an additional SETBP1 mutation. (2014)
  • 著者名/発表者名: T. Kitamura, D. Inoue, and J. Kitaura.
  • 学会等名: Molecular Aspects of Myeloid Stem Cell Development and Leukemia.
  • 発表場所: シンシナティ・米国
  • 年月日: 2014-05-04 – 2014-05-07
• [学会発表] Modeling hematological malignancies. (2014)
  • 著者名/発表者名: T. Kitamura.
  • 学会等名: Hematopoiesis meeting.
  • 発表場所: ルンド・スウェーデン
  • 年月日: 2014-04-24 – 2014-04-25
  • 招待講演