生体防御に関わる細胞表面受容体のシグナル検知機構の解析

2014 年度 実績報告書

• 研究領域: 細胞シグナリング複合体によるシグナル検知・伝達・応答の構造的基礎
• 研究課題/領域番号: 22121007
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 前仲 勝実 北海道大学, 薬学研究科(研究院), 教授 (10322752)
• 研究期間 (年度): 2010-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 蛋白質 / 免疫学 / ウイルス / 生体分子 / 薬学

研究実績の概要

1. Natural Killer cell receptor P1 (NKR-P1)/CD161とLLT1との分子認識機構については、まずはLLT1の結晶構造解析を論文として発表した。さらにNKR-P1-LLT1相互作用について、両者の変異体を用いて、新たな複合体モデルに基づく、結合解析を進めた。その結果を踏まえて、複合体の結晶構造解析に向けた複数のNKR-P1変異体の作成を行い、より安定な蛋白質を得ることに成功した。今後は、これらの変異体の活性評価とともに複合体の結晶化に取り組む。
2. CD160については安定な変異体の15N,13Cラベル体を用いて、NMRスペクトルにてほぼ全ての主鎖帰属に成功した。次に、HVEM添加によるスペクトル変化を観察する事を試みたが、凝集が見られ、現時点では結合する事のみ明らかとなった。さらに、CD160に対する特異的抗体を作成するために、ラットに免疫を行い、モノクローナル抗体中である。
3. 麻疹ウイルス表面受容体結合蛋白質の受容体結合部位のポケットをターゲットにin silico screeningを行い、結合候補となる約５００化合物にについて、東京大学創薬センターから供与された化合物を実際に用いて、ウイルス感染阻害効果のある化合物を１０数種類得ることに成功した。現在、最適化に向けた化合物の検討を進めており、細胞融合実験を通して、作用機序を明らかにする予定である。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Crystal structure of extracellular domain of human lectin-like transcript 1 (LLT1), the ligand for natural killer receptor-P1A. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kita S, Matsubara H, Kasai Y, Tamaoki T, Okabe Y, Fukuhara H, Kamishikiryo J, Krayukhina E, Uchiyama S, Ose T, Kuroki K, Maenaka K.
  • 雑誌名: Eur. J. Immunol. 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1002/eji.201545509
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] The structural basis for receptor recognition of human interleukin-18. (2015)
  • 著者名/発表者名: 2.Tsutsumi N, Kimura T, Arita K, Ariyoshi M, Ohnishi H, Yamamoto T, Park EY, Maenaka K, Zuo X, Kondo N, Shirakawa M, Tochio H, Kato Z.
  • 雑誌名: Nat. Commun. 巻: 5 ページ: 5340
  • DOI: 10.1038/ncomms6340
  • 査読あり
• [学会発表] 免疫系受容体Mincle とMCL の糖脂質認識の分子基盤 (2015)
  • 著者名/発表者名: 前仲勝実
  • 学会等名: 日本薬学会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2015-03-26
  • 招待講演
• [学会発表] 糖脂質・糖ペプチドを認識する免疫系受容体の構造生物学的研究 (2014)
  • 著者名/発表者名: 前仲勝実
  • 学会等名: 日本生化学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2014-10-16
  • 招待講演
• [備考] 構造細胞生物学ホームページ
  • URL: http://convallaria.pharm.hokudai.ac.jp/scb/