| 研究概要 |
生殖腺を構成する各種細胞が蛍光で可視化できるトランスジェニックメダカの確立と維持、さらには変異体との交配を行った。その結果、野生型のトランスジェニックと変異体のトランスジェニックの系統が揃うこととなった。これらについて、性ホルモンを用いて表現型としての全雌集団と全雄集団が得られるよう処理を行い、その条件を検討した。さらに、雌雄判別のゲノムタイピングのプライマー設計とPCRの条件検討を行った。これらの結果により,表現型の性と遺伝レベルの性とが簡便に多数の個体で判別できるようになりつつある。一方,確立しつつあるメダカトランスジェニックの生殖腺における細胞の挙動を共焦点レーザー顕微鏡で詳細な解析を行い、各細胞の組織構築過程を単一細胞レベルで調べると共に、どのステージの生殖腺から細胞を単離すべきか検討を継続している。そのためにトランスジェニックメダカの単離生殖腺から、細胞を解離させる適切な条件、少量の細胞からcDNAをバイアスなしに作製する方法,さらには解離した細胞をセルソーターで純化するために条件の総合的な検討を行った。またメダカはマイクロアレイが不完全であるので、現在のゲノム情報を統合的解析し、質の良いマイクロアレイ作製の検討を行なっている。
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