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2012 年度 実績報告書

中心体・一次シリアと細胞周期

計画研究

研究領域シリア・中心体系による生体情報フローの制御
研究課題/領域番号 24113005
研究機関愛知県がんセンター(研究所)

研究代表者

稲垣 昌樹  愛知県がんセンター(研究所), 発がん制御研究部, 部長 (30183007)

研究分担者 五島 直樹  独立行政法人産業技術総合研究所, 創薬分子プロファイリング研究センター, 主任研究員 (70215482)
研究期間 (年度) 2012-06-28 – 2017-03-31
キーワード一次シリア / 中心体 / 細胞周期
研究実績の概要

トリコプレインが、血清飢餓下のRPE1/hTERT細胞において、ユビキチン-プロテアソーム系により分解されることを見出した。また、細胞をプロテアソーム阻害剤で処理すると、血清飢餓後の一次シリア形成が妨げられた。これらの結果は、ユビキチン-プロテアソーム系は、トリコプレインの分解を介してシリア形成に関与していることを示唆している。さらに、E3リガーゼを約1000種類搭載したE3リガーゼプロテインマイクロアレイを用いて、トリコプレインに対するE3リガーゼを結合特異性を基に探索し、KCTD17を含むいくつかのE3リガーゼを同定した。また、我々が命名した新規のドメイン(Trichohyalin/Plectin Homology Domain,TPHD)をもつTPHD蛋白質群やCCDC蛋白質群を培養細胞で強制発現してそれらの中心体局在を確認した。さらに、これらの蛋白質のsiRNAiによるノックダウン実験を行い、一次シリアの形成を詳細に観察した。一方、我々は、Plk1のSer99 が、PI3K-Aktキナーゼカスケードによってリン酸化されること、そして、このリン酸化を阻害すると、染色体の整列/分離が強く障害されることを見出した。さらに、siRNA による阻害実験から、Plk1 を強くノックダウンすると全てのPlk1機能が障害されるが、不完全にノックダウンした場合には染色体の整列/分離が障害されることを明らかにした。すなわち、染色体の整列/分離には、より高いPlk1 活性が必要であると示唆される。以上の結果より、Plk1はPolo-box ドメインによる基質選別だけでなく、リン酸化によるキナーゼ活性の制御によってその多彩な機能を調節していると考えられる。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

トリコプレインが一次シリア形成を制御するメカニズムとして、新たにユビキチン-プロテアソーム系の関与を見出した。また、TPHD類縁蛋白質群の機能解析も順調に進展している。

今後の研究の推進方策

一次シリアにおけるユビキチン-プロテアソーム系の役割の解明は、大きな意義があると考えられるので、ノックアウトマウスの作製なども行っていく予定である。また、TPHD類縁蛋白質群の機能解析も予定どおり行っていく。

  • 研究成果

    (7件)

すべて 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (2件) (うち招待講演 1件) 図書 (1件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] PI 3-kinase-dependent phosphorylation of Plk1-Ser99 promotes association with 14-3-3γ and is required for metaphase-anaphase transition.2013

    • 著者名/発表者名
      Kasahara, K.
    • 雑誌名

      Nat. Commun.

      巻: 4 ページ: 1882

    • DOI

      10.1038/ncomms2879

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Cell cycle progression by the repression of primary cilia formation in proliferating cells.2013

    • 著者名/発表者名
      Goto, H.
    • 雑誌名

      Cell. Mol. Life Sci.

      巻: - ページ: -

    • DOI

      -

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Trichoplein and Aurora A block aberrant primary cilia assembly in proliferating cells.2012

    • 著者名/発表者名
      Inoko, A.
    • 雑誌名

      J. Cell Biol.

      巻: 197 ページ: 391-405

    • DOI

      10.1083/jcb.201106101

    • 査読あり
  • [学会発表] Intermediate filaments and site- and phosphorylation state-specific antibodies.2012

    • 著者名/発表者名
      Inagaki, M.
    • 学会等名
      Global COE the 4th International Symposium
    • 発表場所
      ホテルルブラ王山(名古屋)
    • 年月日
      2012-11-15
  • [学会発表] Intermediate filaments and site- and phosphorylation state-specific antibodies.2012

    • 著者名/発表者名
      Inagaki, M.
    • 学会等名
      Lecture at The University of Gothenburg
    • 発表場所
      The University of Gothenburg (Gothenburg, Sweden)
    • 年月日
      2012-09-24
    • 招待講演
  • [図書] Monoclonal Antibodies: Methods and Protocols, Second Edition, “Methods in molecular biology” series2013

    • 著者名/発表者名
      Goto, H.
    • 総ページ数
      -
    • 出版者
      Humana Press.
  • [備考] 愛知県がんセンターホームページ

    • URL

      http;//www.pref.aichi.jp/cancer-center

URL: 

公開日: 2018-02-02  

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