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2016 年度 実績報告書

バクテロイデーテス細菌の滑走運動マシナリーの構造とダイナミクス

計画研究

研究領域運動超分子マシナリーが織りなす調和と多様性
研究課題/領域番号 24117006
研究機関長崎大学

研究代表者

中山 浩次  長崎大学, 医歯薬学総合研究科(歯学系), 教授 (80150473)

研究分担者 佐藤 啓子  長崎大学, 医歯薬学総合研究科(歯学系), 助教 (70410579)
研究期間 (年度) 2012-06-28 – 2017-03-31
キーワード運動 / 細菌 / 蛋白質分泌
研究実績の概要

1. Flavobacterium johnsoniaeの滑走運動についてSprBを蛍光抗体でラベルしてその動きを詳細に観察したところ、細菌細胞の極から極に移動する過程で他のSprBを追い抜いたり、または途中で方向転換するSprBが存在することがわかり、SprBが移動する軌道は複数存在することがわかった。2. F. johnsoniaeの滑走運動に関係するマルチレール構造を外膜の内面に発見している。今回、免疫電顕を用いてこのマルチレール構造にGldJタンパク質が含まれていることが明らかになった。GldJ-GFP融合タンパク質などを本菌で発現させ、その局在をTIRF顕微鏡で調べた。菌体上部に左巻きラセン状に存在することが示唆された。3. 他のgld変異株もマルチレール構造が欠損しているのでそれらの変異株がGldJタンパク質をもっているかどうかを調べたところ、gldK, gldL, gldM, gldNO変異株ではGldJタンパク質は発現しているものの、野生株と比較するとマルチマー化に障害があることがわかった。4. 他の滑走細菌であるSaprospira grandisについてオスモティックショック後の酢酸ウランでの陰性染色の透過型電顕観察およびインタクトな細菌細胞でのクライオ電顕観察の結果、明瞭にマルチレール構造を観察することができた。その構造はF. johnsoniaeでの酢酸ウランでの電顕観察やフリーズレプリカでの電顕観察でのマルチレール構造と非常によく似ていた。5. 寒天培地上でのコロニー・スプレッディングについては菌体外にある種のリポタンパク質について脂質部分が切断されて分泌されることがわかった。リポタンパク質の輸送に関与するLolAホモログの欠損株を作製したところ、コロニー・スプレッディングが起こらないことがわかった。

現在までの達成度 (段落)

28年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

28年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2017 2016 その他

すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (2件) (うち国際共著 1件、 査読あり 2件、 オープンアクセス 2件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (3件) (うち国際学会 2件、 招待講演 3件)

  • [国際共同研究] メルボルン大学(オーストラリア)

    • 国名
      オーストラリア
    • 外国機関名
      メルボルン大学
  • [雑誌論文] Structural Insights into the PorK and PorN Components of the Porphyromonas gingivalis Type IX Secretion System.2016

    • 著者名/発表者名
      Gorasia DG, Veith PD, Hanssen EG, Glew MD, Sato K, Yukitake H, Nakayama K, Reynolds EC
    • 雑誌名

      PLoS Pathog

      巻: 12 ページ: e1005820

    • DOI

      10.1371/journal.ppat.1005820

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] The complete genome sequencing of Prevotella intermedia strain OMA14 and a subsequent fine-scale, intra-species genomic comparison reveal an unusual amplification of conjugative and mobile transposons and identify a novel Prevotella-lineage-specific repeat.2016

    • 著者名/発表者名
      Naito M, Ogura Y, Itoh T, Shoji M, Okamoto M, Hayashi T, Nakayama K
    • 雑誌名

      DNA Res

      巻: 23 ページ: 11-19

    • DOI

      10.1093/dnares/dsv032

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] バクテロイデーテス門細菌のIX型分泌機構およびV型線毛の研究2017

    • 著者名/発表者名
      中山浩次
    • 学会等名
      日本細菌学会
    • 発表場所
      仙台国際センター(宮城県仙台市)
    • 年月日
      2017-03-19 – 2017-03-21
    • 招待講演
  • [学会発表] The type IX secretion, gliding motility and the type V pilus2016

    • 著者名/発表者名
      Nakayama K
    • 学会等名
      Protein Secretion in Bacteria Conference
    • 発表場所
      シラタ・ビーチ・リゾート・ホテル(米国フロリダ州タンパ)
    • 年月日
      2016-11-09 – 2016-11-12
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Type IX secretion system and gliding motility in Bacteroidetes phylum bacteria2016

    • 著者名/発表者名
      Nakayama K
    • 学会等名
      The 13th Korea-Japan International Symposium on Microbiology
    • 発表場所
      K ホテル(韓国慶州市)
    • 年月日
      2016-05-12 – 2016-05-13
    • 国際学会 / 招待講演

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公開日: 2018-01-16  

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