計画研究
本研究は、CD169マクロファージによる死細胞の貪食機構とそれに伴う免疫制御機構の解明を目指す。本年度は以下の研究を進めた。1.腸炎におけるCD169陽性マクロファージの死細胞認識我々は、マウスDSS誘導腸炎モデルにおいて、腸の粘膜下層に局在するCD169陽性マクロファージが病態形成に重要な役割を担っていることを明らかにした。このマクロファージは、粘膜下層の中で粘膜筋板の近傍に局在し、腸上皮の傷害や最近の侵入に応答して、炎症を惹起する役割を担っている。我々は、このCD169陽性マクロファージが、ケモカインの一種であるCCL8が特異的に発現していることを見いだした。さらに、germ-freeマウスにおいても、CCL8の産生が見られることから、細菌だけでなく組織傷害を認識して、同ケモカインを産生することが示唆された。この認識機構を明らかにするために、我々はBMDMを用いてin vitroでの死細胞認識-CCL8産生のアッセイ系を確立し、マクロファージ表面抗原に対するモノクローナル抗体のスクリーニングを行っている。現在阻害活性を有するいくつかのモノクローナルが樹立できつつある。また、これとは別に、死細胞由来の粒子がCD169マクロファージに選択的に取り込まれることをつきとめており、さらにこの取り込みにCD169分子が関与していることも明らかにした。この取り込みとがん細胞死に伴うマクロファージの挙動の関連についても検討を進めている。2.細胞死に伴う炎症誘導機構における領域内共同研究領域内共同研究として、田中稔班、中野班とマクロファージの肝傷害における役割について、マクロファージ特異的消去マウスを用いて研究を行っている。また、袖岡班が独自に開発した新規細胞死制御化合物が、腎臓虚血再灌流傷害に対して抑制効果を持つことを明らかにし、そのメカニズムを解析している。
2: おおむね順調に進展している
本領域では、多様な細胞死様式の分子機構と死細胞が周囲の細胞に発信する情報の特定とその受容機構の解明を目指している。本研究はこの領域のコンセプトに沿って、マクロファージによる死細胞の認識とその応答の分子基盤を明らかにすることを第一の目的としている。これまでの２年間で我々は、腸炎モデルにおいて、CD169陽性マクロファージが組織傷害（死細胞および死細胞放出因子）を認識して、特異的にCCL8を産生することを明らかにすることができた。さらに、上述のようにこの認識と産生機構に関与する分子の同定につながる可能性のある、マクロファージに対するモノクローナル抗体を複数樹立できつつある。これらの点から、予定通りに研究が進んでいると考えており、次年度以降に分子の同定と機能解析を行う予定である。また、上述のようにCD169陽性マクロファージは、死細胞由来分子だけでなく、死細胞由来の粒子状物質も選択的に取り組むことが分かってきた。今後、この粒子状物質の取り込みの分子基盤とその生理的、病理的意義についても検討を行っている。領域内の研究共同研究についても、肝細胞死共同プロジェクトとして、田中稔班、中野班と緊密な連携ができている。また、袖岡班が独自に開発した新規細胞死制御化合物の治療効果も確認するができ、さらに細胞死様式に関する新たな共同プロジェクトを袖岡班、今井班（公募班）を立ち上げている。これらのことから、領域内共同研究も順調であると評価する
1.マクロファージによる死細胞の認識機構CD169陽性マクロファージが、死細胞由来因子を認識してCCL8を特異的に産生する分子機構を明らかにする。すでに我々は、マクロファージ表面分子に対するモノクローナル抗体を作製し、死細胞レセプター分子を認識する可能性のあるモノクローナル抗体を複数樹立しつつある。これを用いて、レセプター分子を精製し、質量分析により同定を試みる。レセプター分子が同定できた場合は、この分子が認識する死細胞放出分子の同定を試みる。また、CD169陽性マクロファージが、CD169分子を介して細胞由来の微小粒子を認識し、処理することが明らかになっているので、このマクロファージによる微小粒子の、がん免疫およびがん転移における役割を明らかにする。2.疾患動物モデルにおける死細胞様式の意義腎虚血再灌流傷害については、すでに袖岡班との連携により、非アポトーシス細胞死阻害剤の効果を検証し一定の効果があることをつきとめている。さらに、その標的細胞の一つが好中球である可能性を示唆する知見を得ているので、その分子メカニズムを明らかにする。さらに、袖岡班、今井班との連携により、好中球のNET形成に影響を与える低分子化合物の探索を通じて、その分子機構の解明を試みる。3.肝細胞死共同研究プロジェクト引き続き、食細胞による肝死細胞貪食と炎症制御機構の解明を試みる。田中稔班と中野班と共同で、各種肝細胞死モデルにおけるこれらマクロファージの動態を解析するとともに、各種マクロファージを誘導的に消失できるマウス（CD169-DTR, CD204-DTR）を用いて、各マクロファージの病態への関与を検討する。
すべて 2015
すべて 雑誌論文 (5件) (うち国際共著 1件、 査読あり 5件、 オープンアクセス 5件、 謝辞記載あり 4件) 学会発表 (4件) (うち国際学会 2件、 招待講演 2件)
Current Topics in Microbiology and Immunology
巻: ※ ページ: 1-13
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