srcファミリー遺伝子fynのリンホーマ並びに正常リンパ球における発現と機能

1989 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 01015020
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 片桐 拓也 東京大学, 医科学研究所, 助手 (70126100)
• 研究分担者: 須田 容子 理化学研究所, 研究員 (90201582) ; 仙波 憲太郎 東京大学, 医科学研究所, 助手 (70206663) ; 狩野 恭一 東京大学, 医科学研究所, 教授 (80152825)
• キーワード: srcファミリー / fyn / チロシン燐酸化酵素 / lpr / Tリンパ球 / 遺伝子導入

研究概要

srcファミリー遺伝子fynの発現制御機構と、その産物p59^<fyn>チロシンキナーゼの生理的機能を解析し、以下の知見を得た。(1)発現:1prマウスで腫大リンパ節を構成する異常T細胞においては、p59^<fyn>キナーゼの活性が10倍亢進しており、これはfyn mRNAの過剰発現による。正常T細胞におけるfyn mRNAの誘導発現は、細胞内Ca^<++>レベル(up)とcAMPレベル(down)により調節を受ける。この誘導発現がtransientであるのに対し、1prT細胞の発現はconstitutiveであり、発現を継続維持させる内在性因子が作働しているものと思われる。今後、更に両者のメカニズムを解析してfyn遺伝子の発現に関与する調節因子(群)を同定したい。Tリンパ球以外にもB前駆細胞や、TPAにより分化したマクロファージにおいてもfynの強い発現を認めた。こうしたstageー及びlineageーspecificityを有するfyn遺伝子発現の生通的意義の解明も次年度以降の課題である。(2)機能:活性化T細胞においてp59^<fyn>がCーキナーゼによって燐酸化されることが判明し、p59^<fyn>キナーゼも、いわゆるキナーゼサーキットの一員として活性化シグナルの伝達に機能している可能性が示された。p56^<lck>とのアナロジーとして、p59^<fyn>が細胞内で他の分子種(細胞表面レセプター及び基質分子)と機能的複合体を形成しているものと考えられるが、そうした会合分子の候補として、分子量75kdの蛋白分子が見出された。現在、この分子を同定しつつある。今年度、活性型及び不活性型fynDNA更にはアンチセンスオリゴヌクレオチドを作成した。これらを種々の機能を有する免疫系細胞に導入してその機能変化を解析することによって、p59^<fyn>キナーゼのシグナル伝達系における役割を推定し得るものと期待している。新たに作成した活性型fyn遺伝子を導入したトランスジェニックマウスの解析結果からも有意義な知見が得られるはずである。

研究成果

• [文献書誌] Katagiri,T.: "Overexpression of src family tyrosine-kinase p59^<fyn> in CD4^-CD8^-T cells of mice with lymphoproliferative disorder." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 86. 10064-10068 (1989)
• [文献書誌] Katagiri,T.: "Tyrosine phosphorylation of a cーsrcーlike protein is increased in abnormal CD4^-CD8^-T lymphocytes from lpr/lpr mice." Mol,Cell.Biol.9. 4914-4922 (1989)
• [文献書誌] Semba,K,: "Transformation of chicken embryo fibroblast cells by avian retroviruses containing the human fyn gene and its mutated genes" Mol.Cell.Biol.(1990)
• [文献書誌] Matsuzawa,A.: "A new allele of the lpr locus,lpr^<cg> that complements the gld gene in induction of lymphadenopathy in the mouse" J.Exp,Med.(1990)
• [文献書誌] 片桐拓也: "病態モデル:全身性リンパ節腫脹と自己免疫疾患を惹起する劣性遺伝子" 蛋白質・核酸・酵素. 34. 2015-2027 (1989)
• [文献書誌] 片桐拓也: "リンパ球の分化・活性化とsrcファミリーチロシン燐酸化酵素" Medical Immunology. (1990)
• [文献書誌] 山村雄一: "最新免疫学II" 同文書院, 806 (1990)
• [文献書誌] Sikora,K.,Carney,D.: "Genes and Cancer" John Wiley&Sons, (1990)