| 研究課題/領域番号 |
01015105
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| 研究機関 | 日本医科大学 |
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研究代表者 |
仁井谷 久暢 日本医科大学, 医学部, 教授 (10076945)
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| 研究分担者 |
酒井 茂利 日本医科大学, 医学部, 助手 (70142536)
倉根 修二 日本医科大学, 医学部, 助手 (70186493)
渋谷 昌彦 日本医科大学, 医学部, 助手 (50142534)
青山 昭徳 日本医科大学, 医学部, 講師 (60089688)
矢野 侃 日本医科大学, 医学部, 講師
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| キーワード | LAK細胞 / 養子免疫療法 / 抗癌剤 / 肺癌 |
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| 研究概要 |
1.Human tumor clonogenic cell assay(HTCA)における抗癌剤(Cisplatin,Mitomycin C,Vindesine,AdriamycinとLyinphokine activated killer(LAK)細胞の同時暴露、抗癌剤暴露後にLAK細胞暴露、LAK細胞暴露後に抗癌剤暴露の各併用法の腫瘍細胞コロニー抑制率は、抗癌剤単独もしくは、LAK細胞単独に比較して、有意に高い抑制効果を示した。しかし、各併用法間における差は認められなかった。
2.LAK活性に及ぼす凍結保存の影響を末梢血リンパ球(PBMC)、あるいはInterleukinー2(ILー2)処理後のLAK細胞を用いて検討した結果、融解直後の生細胞率および回収率はそれぞれ約70%、60%で、凍結PBMCは1週間の培養により新鮮PBMCと同等のLAK活性が誘導され、融解直後のLAK細胞は新鮮LAK細胞の60%程度の活性であった。
3.LAK療法施行に際しては、活性の高い大量のLAK細胞を安定して誘導する技術の確立が必要である。我々はcell separator(Hemoritics Vー50)を用い、surge法により患者末梢血よりlyinphocyte rich fractionを分離し、heparinを添加したgas Parmeable cultureーbagー(stericell)に回収するという方法を考案した。培養の初期には2%ヒトAB血清を含むILー2加無血清培地を用い、以後細胞の増殖に伴ないILー2加無血清培地を加え、2週間培養を続けた。その結果、細胞数は約10倍に増加し、培養開始3日目より2週まで高いLAK活性が維持できた。以上の様に、leukepheresisからLAK細胞回収までの一連の操作をsemiーclosed systemにて行ない、更に、血清消費の少ない無血清培地を使用することにより、簡便、無菌的かつ経済的にLAK細胞の大量培養が可能となり、現在、肺癌患者を対象に検討中である。
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