1989 年度実績報告書

がん細胞における細胞骨格の異常

研究課題

研究課題/領域番号	01015130
研究機関	(財)東京都臨床医学総合研究所
研究代表者	矢原一郎東京都臨床医学総合研究所, 細胞生物, 部長 (60109957)
キーワード	アクタン / 熱ショックタンパク質 / トリ肉腫ウィルス / ステロイドホルモン受容体 / コフィリン / 核内移行シグナル / カゼインキナーゼII
研究概要	トリ肉腫ウィルスのがん遺伝子産物pp60^<vーsrc>、ステロイドホルモン受容体、ダイオキシン受容体等は細胞質で熱ショックタンパク質HSP90と複合体を形成している。前年度グルココルチコイド受容体とHSP90の複合体がアクチンに結合することを示したが、本年度はこの結合が特異的であることを次の結果によって示した。先ずこの結合がCa^<2+>・カルモデュリンによって阻害されることを確認した。次に複合体の安定剤モリブデン酸を除き、さらに高塩濃度で抽出することによって、4Sのグルココルチコイド受容体(HSP90から離れた)を得てアクチンとの結合を見たが、結合しなかった。 HSP90の作用を介してアクチン繊維と相互作用する機能タンパク質として新たにカゼインキナーゼIIを同定した。これは、ヘパリンによって阻害されるカゼインキナーゼII(CKII)基質特異性を示すキナーゼがHSP90と共に精製されること、および抗HSP90抗体で共免疫沈澱されることによって示された。見かけ上完全精製されたマウスHSP90標品(SDSーPAGEの染色で単一バンド)にも、gamma^^<32>ーPーATPを加えるとHSP90をリン酸化する活性があり、その活性はCKIIの特徴をすべて備えていた。熱ショックや分化誘導剤DMSOによってアクチンと共に細胞質から核内に移行し遺伝子発現の変化やRNAスプライシングの異常に関与する可能性のあるアクチン結合タンパク質コフィリンの機能ドメインの同定を試みた。N端に近い部位にある核移行シグナル様の配列KKRKKの一部又は全部を部位指定突然変異誘導法で改変発現させたところ、この部位は核移行シグナルとして作用する他に、アクチンとの相互作用にも必要であることが明らかになった。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Y.Miyata et al.: "Regulation of intracellular Ca^<2+> and cAMP of the growth factorーinduced ruffling membrane formation and stimulation of fluidーphase endocytosis and exocytosis." Experimental Cell Research. 181. 454-462 (1989)
[文献書誌] S.Koyasu et al.: "HSP100,a 100ーkDa heat shock protein,is a Ca^<2+>ーcalmudulinーregulated actin binding protein." Journal of Biological Chemistry. 264. 15083-15087 (1989)
[文献書誌] S.Koyasu et al.: "Growth regulation of multifactorーdependent myeloid cell lines:ILー4,TGFーbeta and pertussis toxin mudulate ILー3ーand GMーCSFーinduced growth by controlling cell cycle length." Cell Structure and Function. 14. 459-471 (1989)
[文献書誌] Y.Miyata et al.: "Protein kinase Cーdependent and independent pathways in the growth factorーinduced cytoskeletal reorganization." Journal of Biological Chemistry. 264. 15562-15568 (1989)
[文献書誌] M.Takahashi et al.: "Molecular basis for determining the sensitivity of eucaryotes to an antimitotic drug,rhizoxin." Molecular General Genetics. (1990)
[文献書誌] K.Moriyama et al.: "Destrin,a mammalian actinーdepolymerizing protein,is closely related to cofilinーーーcloning and expression of porcine brain destrin cDNA." Journal of Biological Chemistry. 265. (1990)

1989 年度 実績報告書

がん細胞における細胞骨格の異常

研究代表者

矢原 一郎 東京都臨床医学総合研究所, 細胞生物, 部長 (60109957)

研究成果

[文献書誌] Y.Miyata et al.: "Regulation of intracellular Ca^<2+> and cAMP of the growth factorーinduced ruffling membrane formation and stimulation of fluidーphase endocytosis and exocytosis." Experimental Cell Research. 181. 454-462 (1989)

[文献書誌] S.Koyasu et al.: "HSP100,a 100ーkDa heat shock protein,is a Ca^<2+>ーcalmudulinーregulated actin binding protein." Journal of Biological Chemistry. 264. 15083-15087 (1989)

[文献書誌] S.Koyasu et al.: "Growth regulation of multifactorーdependent myeloid cell lines:ILー4,TGFーbeta and pertussis toxin mudulate ILー3ーand GMーCSFーinduced growth by controlling cell cycle length." Cell Structure and Function. 14. 459-471 (1989)

[文献書誌] Y.Miyata et al.: "Protein kinase Cーdependent and independent pathways in the growth factorーinduced cytoskeletal reorganization." Journal of Biological Chemistry. 264. 15562-15568 (1989)

[文献書誌] M.Takahashi et al.: "Molecular basis for determining the sensitivity of eucaryotes to an antimitotic drug,rhizoxin." Molecular General Genetics. (1990)

[文献書誌] K.Moriyama et al.: "Destrin,a mammalian actinーdepolymerizing protein,is closely related to cofilinーーーcloning and expression of porcine brain destrin cDNA." Journal of Biological Chemistry. 265. (1990)

1989 年度実績報告書

矢原一郎東京都臨床医学総合研究所, 細胞生物, 部長 (60109957)