性ステロイドホルモン受容体mRNAに関する基礎的ならびに臨床的研究

1990 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 01440069
• 研究機関: 山梨医科大学
• 研究代表者: 加藤 順三 山梨医科大学, 医学部, 教授 (80082121)
• 研究分担者: 端 晶彦 山梨医科大学, 医学部, 助手 (10208431) ; 池上 淳 山梨医科大学, 医学部, 助手 (10212755) ; 平田 修司 山梨医科大学, 医学部, 助手 (00228785) ; 木下 俊彦 山梨医科大学, 医学部, 講師 (90186289) ; 今西 由紀夫 山梨医科大学, 医学部, 講師 (40134572)
• キーワード: ステロイドホルモン受容体mRNA / ノザンブロット法 / RTーPCR法 / エストロゲン受容体 / プロゲステロン受容体 / アンドロゲン受容体 / ラットPRcDNA / in situハイブリダイゼ-ション法

研究概要

本年度は、ラットおよびヒトの諸組織におけるステロイドホルモン受容体(SHR)mRNAの分布について主に検討をおこなった。昨年度すでに明らかにしたように、SHRmRNAの発現量が一般的に低レベルであるため、従来からのmRNAの検出方法であるノザンブロット法によるSHRmRNAの解析には限界があった。そこでわれわれはまず、より鋭敏でしかも定量性のあるSHRmRNAの検出方法を確立する目的で、遺伝子増幅法を応用したRTーPCR(Reverse TranscriptionーPlymerase Chain Reaction)法によるSHRmRNAの検出法を確立した。つづいて、このRTーPCR法により、ラットの性ステロイドホルモンの「標的」および「非標的」組織におけるエストロゲン受容体(ER)、プロゲステロン受容体(PR)ならびにアンドロゲン受容体(AR)の分布について検討をおこない、これら受容体mRNAが「標的」組織のみならず「非標的」組織にも広汎に存在していることを明らかにすると同時に、これら受容体の量的調節が主にmRNAのレベルの調節によりおこなわれていることを明らかにした。さらに、RTーPCR法による増幅遺伝子の解析により、これまで部分的にもその一次構造が解明されていなかったラットのPRcDNAの塩基配列を部分的に明らかにした。
また、<in>___ー <situ>___ーハイブリダイゼ-ション法によるSHRmRNAの組織内局在の検出方法を確立し、ラット脳におけるPRmRNAの分布、ラット子宮におけるERmRNAの分布などについて検討をおこなった。
現在、次年度への継続的研究課題として、これらの方法によりラット脳におけるSHRmRNAのontogenyの解析、正常ならびに病的組織におけるSHRmRNAのレベルおよび構造の解析の2課題についてすでに研究を開始している段階である。

研究成果

• [文献書誌] 平田 修司、加藤 順三: "シンポジウムII「細胞内ホルモン受容体異常症の分子遺伝学」正常ならびに病的組織におけるERmRNAの解析" 日本内分泌学会雑誌(抄録集). 66ー4. 234 (1990)
• [文献書誌] J.Kato,S.Hirata: "Analysis of sex steroid hormone receptor mRNA in central and peripheral reproductive tissues" Beijing International Symposium of Reproductive Biology (Abstract).
• [文献書誌] 加藤 順三 平田 修司: "性ステロイドホルモン受容体mRNAの解析" 第23回日本医学会総会シンポジウム.
• [文献書誌] 平田 修司 平井 光男 萩原 和紀 長田 孝明 加藤 順三: "ヒト子宮におけるERmRNAの検出ーRTーPCRによる検討" エンドメトリオ-ジス研究会誌(vol 12).
• [文献書誌] 平井 光男、平田 修司、萩原 和紀、長田 孝明、加藤 順三: "ラット内性器におけるARmRNAの発現" 日本内分泌学会雑誌(抄録集). 66ー9. 880 (1990)
• [文献書誌] 平田 修司、平井 光男、長田 孝明、萩原 和紀、加藤 順三: "ラット中枢各部におけるERmRNAの検出" 日本内分泌学会雑誌(抄録集). 66ー9. 941 (1990)
• [文献書誌] 長田 孝明、平田 修司、平井 光男、萩原 和紀、加藤 順三: "ラット末梢組織におけるERmRNAの検出" 日本内分泌学会雑誌(抄録集). 66ー9. 942 (1990)
• [文献書誌] 萩原 和紀、平田 修司、平井 光男、長田 孝明、加藤 順三: "新生仔ラット大脳皮質におけるエストロゲン受容体mRNAの発現" 日本内分泌学会雑誌(抄録集). 66ー9. 992 (1990)
• [文献書誌] 平井 光男,平田 修司,萩原 和紀,長田 孝明,加藤 順三: "ラット前立腺アンドロゲンレセプタ-(AR)mRNAに及ぼす去勢の影響" 日本内分泌学会雑誌.
• [文献書誌] 平田 修司,平井 光男,萩原 和紀,長田 孝明,加藤 順三: "ラット脳におけるアロドロゲンレセプタ-mRNAの検出ーRTーPCR法による検討" 日本内分泌学会雑誌.
• [文献書誌] 萩原 和紀,平田 修司,平井 光男,長田 孝明,加藤 順三: "ラット末梢諸組織におけるアンドロゲンレセプタ-mRNAの検出ーRTーPCR法による検討" 日本内分泌学会雑誌.
• [文献書誌] 長田 孝明,平田 修司,平井 光男,萩原 和紀,加藤 順三: "ヒト子宮におけるアンドロゲンレセプタ-mRNAの検出ーRTーPCR法による検討" 日本内分泌学会雑誌.
• [文献書誌] 萩原 和紀、平田 修司、長田 孝明、平井 光男、加藤 順三: "ラット中枢におけるプロゲステロンレセプタ-(PR)mRNAの検出:RTーPCR法による検討" 日本産科婦人科学会雑誌(講演抄録). 43. 223 (1991)
• [文献書誌] 平田 修司、萩原 和紀、平井 光男、長田 孝明、加藤 順三: "ラットプロゲステロンレセプタ-(PR)cDNAの部分的クロ-ニング" 日本産科婦人科学会雑誌(講演抄録). 43. 223 (1991)
• [文献書誌] 長田 孝明、平田 修司、萩原 和紀、平井 光男、加藤 順三: "ヒト子宮におけるプロゲステロンレセプタ-(PR)mRNAの検出:RTーPCR法による検討" 日本産科婦人科学会雑誌(講演抄録). 43. 420 (1991)