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1990 年度 研究成果報告書概要

微生物による複合糖質代謝関連酵素の生産並びに応用

研究課題

研究課題/領域番号 01470123
研究種目

一般研究(B)

配分区分補助金
研究分野 応用微生物学・発酵学
研究機関京都大学

研究代表者

栃倉 辰六郎  京都大学, 農学部, 教授 (70026524)

研究分担者 山本 憲二  京都大学, 農学部, 助手 (70109049)
鈴木 秀之  京都大学, 農学部, 助手 (10202136)
熊谷 英彦  京都大学, 農学部, 助教授 (70027192)
矢野 俊博  京都大学, 農学部, 教務職員 (30135553)
研究期間 (年度) 1989 – 1990
キーワードエンド-βーNーアセチルグルコサミニダ-ゼ / 複合型糖鎖 / A型血液型物質 / αーNーアセチルガラクトサミニダ-ゼ / αーLーフコシダ-ゼ / エンド-αーNーアセチルガラクトサミニダ-ゼ / 胃癌細胞 / Tー抗原
研究概要

1.Mucorエンド-βーNーアセチルグルコサミニダ-ゼの生産及び特性解析:土壌から分離した糸状菌の一種M.hiemalisをグルコ-ス・有機窒素培地で振盪下3日間培養後,培養3液から各種クロマトグラフィ-により本酵素を単一タンパク質に精製して基本的性質を明らかにした。本酵素は高マンノ-ス型,混成型糖タンパク質糖鎖に高い活性を示したが,複合型糖鎖を有するヒト血清トランスフェリンや子ウシフェツインにも作用した。2. A型血液型物質に作用するαーNーアセチルガラクトサミニダ-ゼの生産及び特性解析:本酵素を培養液中に生産する菌を土壌より単離してAcremoniumsp.と同定し,本酵素を単一タンパク質に精製した。本酵素は種々のA型物質に作用し,αーNーアセチルガラクトサミンを遊離した。3.Bacillus αーLーフコシダ-ゼの生産: 糖タンパク質に作用する本酵素の生産菌を土壌より単離し,B.circulans M28と同定した。本菌は基質特異性の異なる2種のαーLーフコシダ-ゼFーI及びFーIIを生産した。両酵素を単離して基本的性質を明らかにした。4.Fusarium αーLーフコシダ-ゼの酵素的脱糖鎖現象: F.oxysporum の培養液中に糖タンパク質であるαーLーフコシダ-ゼI以外に糖鎖を持たないαーLーフコシダ-ゼIIが存在することを見いだし、これが本菌自身のグリコシダ-ゼの作用でαーLーフコシダ-ゼIから生成したものであることを明らかにした。5.Alcaligenessp.のエンド-αーNーアセチルガラクトサミニダ-ゼの特性解析: 本酵素が赤血球膜や胃癌細胞に存在するGa1B1→3GalNAc(Tー抗原)にも作用することを見いだすとともに,Tー抗原をピリジルアミノ化して微量定量できる方法を開発した。またアグリコンアミノ酸の種類によって反応速度は変化した。

  • 研究成果

    (18件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (18件)

  • [文献書誌] S.Kadowaki: "Isolation and Characterization of a Blood Group A SubstanceーDegrading αーNーAcetylgalactosaminidase from an Acremonium sp." Agricultural and Biological Chemistry. 53. 111-120 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] K.Takegawa: "Primary Structure of an NーLinked Sugar Chain Derived from Glucoamylase of Rhizopus niveus." Biochimica et Biphysica Acta. 990. 98-100 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] S.Kadowaki: "Purification and Characterization of a Novel Fungal EndoーβーNーacetylglucosaminidase Acting on Complex Oligosaccharides of Glycoproteins." Agricultural and Biological Chemistry. 54. 97-106 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] J.ーQ.Fan: "Induction and Efficient Purification of EndoーαーNーacetylgalactosaminidase from Alcaligenes sp." Agricultural and Biological Chemistry. 54. 233-234 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Y.Tsuji: "Purification and Characterization of αーLーFucosidase from Bacillus circulans Grown on Porcine Gastric Mucin." Journal of Biochemistry. 107. 324-330 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Y.Tsuji: "Formation of Deglycosylated αーLーFucosidase by EndoーβーNーacetylglucosaminidase in Fusarium oxysporum." Applied and Environmental Microbiology. 56. 928-933 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] J.ーQ.Fan: "Action of EndoーαーNーacetylgalactosaminidase from Alcaligenes sp.on AminoーacidーOーglucans;Comparison with the Enzyme from Diplococcus pneumoniae." Biochemcal and Biophysical Research Communications. 169. 751-757 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Y.Tsuji: "Purification and Some Properties of a Novel αーLーFucosidase Capable of Acting on αー(1→6)ーLーFucosidic Linkages from Bacillus circulans M28." Journal of Biochemistry. 108. 235-240 (1990)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] J.ーQ.Fan: "Release of Tーantigen, a Carcinoma Marker from Native Human Cells,by EndoーαーNーacetylgalactosaminidase of Alcaligenes sp." Biochemical and Biophysical Research Communications. 172. 341-347 (1990)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] S. Kadowaki, T. Ueda, K. Yamamoto, H. Kumagai and T. Tochikura.: "Isolation and characterization of a blood group A substance-degrading alpha-N-acetylgalactosaminidase from an Acremonium sp." Agricultural and Biochemical Chemistry. 53. 111-120 (1989)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] K. Takegawa, N. Kawasaki, S. Iwahara, K. Yamamoto, T. Tochikura, B. Mikami and Y. Morita.: "Primary structure of an N-linked sugar chain derived from glucoamylase of Rhizopus niveus." Biochimca et Biophysica Acta. 990. 98-100 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] S. Kadowaki, K. Yamamoto, M. Fijisaki, K. Izumi, T. Tochikura and T. Yokoyama.: "Purification and characterization of a novel fungal endo-beta-N-acetylglucosaminidase acting on complex oligosaccharides of glycoproteins." Agricultural and Biochemical Chemistry. 54. 97-106 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] J. -Q. Fan, K. Yamamoto, H. Kumagai and T. Tochikura.: "Induction and efficient purification of endo-alpha-N-acetylgalactosaminidase from Alcaligenes sp." Agricultural and Biochemical Chemistry. 54. 233-234 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Y. Tsuji, K. Yamamoto, T. Tochikura, T. Senoo, Y. Ohkubo and H. Yamaguchi.: "Purification and characterization of alpha-L-fucosidase from Bacillus circulants grown on porcine gastric mucin." Journal of Biochemistry. 107. 324-330 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Y. Tsuji, K. Yamamoto and T. Tochikura.: "Formation of deglycosylated alpha-L-fucosidase by endo-beta-N-acetyglucosaminidase in Fusarium oxysporum." Applied and Environmental Microbiology. 56. 928-933 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] J. -Q. Fan, K. Yamamoto, Y. Matsumoto, Y. Hirabayashi H. Kumagai and T. Tochikura.: "Action of endo-alpha-N-acetylgalactosaminidase from Alcaligenes sp. on amino acide-O-glucans : comparison with the enzyme from Diprococcus pneumoniae." Biochemical and Biophysical Research Communications. 169. 751-757 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Y. Tsuji, K. Yamamoto and T. Tochikura.: "Purification and some properties of a novel alpha-L-fucosidase capable of action on alpha-(1->6)-L-fucosidic linkages from Bacillus circulants M28." Journal of Biochemistry. 108. 235-240 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] J. -Q. Fan, K. Kanaya, N. Ando, K. Yamamoto, H. Kumagai and T. Tochikura.: "Release of T-antigen, a carcinoma maker from native human cells, by endo-alpha-N-acetylgalactosaminidase of Alcaligenes sp." Biochemical and Biophysical Research Communications. 172. 341-347 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より

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公開日: 1993-08-12  

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