1989 年度実績報告書

クライオカルチャ-、セルブロット法による神経成長・標的認識機構分子生物学的研究

研究課題

研究課題/領域番号	01480126
研究機関	大阪大学
研究代表者	村上富士夫大阪大学, 基礎工学部, 教授 (20089882)
研究分担者	勝丸博信大阪大学, 基礎工学部, 助手 (40183264) 小田洋一大阪大学, 基礎工学部, 講師 (00144444)
キーワード	組織培養 / 発生 / 脳 / 発芽 / 神経細胞 / 再生 / クライオカルチャ- / セルブロット
研究概要	神経細胞の軸索成長と標的認識の分子機構の解明は、発生期における回路形成、シナプス発芽や再生の機構の解明に不可欠な極めて重要な問題である。この問題の解明に有力な手段の1つは、脳内に起こるこれらの現象を再現するin vitro標本を用いることである。しかし通常用いられる培養系では脳の構造との関係を知ることが困難である。本研究では、クライオカルチャ-法及びセルブロット法という2つの新しいin vitroアッセイ系を確立して、上記の問題の解決に挑みたい。具体的には、発生期の脳、損傷によって発芽が生ずる部位、及び再生が起こりつつある部位を用い、これらの現象に関与する分子を上記のアッセイ法とモノクロ-ナル抗体法を有機的に組み合せることによって捉えたい。本研究によって、従来の方法では捉えることのできなかった軸索成長・標的認識に関与する微量な分子を明らかにすることが可能になり、これらの現象の分子機構の解明が格段に発展するものと思われる。本年度はクライオカルチャ-法の基礎技術の確立を進めた。すなわちフット、ネコ等の新鮮脳を凍結し、クリオスタットで切片を作製し、これらの切片上で様々な脳の部位・動物種由来の神経細胞を培養(初代培養及び株細胞の培養)を試みた。またこれと平行して基質となる切片には反応せず、その上で培養する細胞のみ特異的に染色するモノクロ-ナル抗体を作製した。これによって脳の部位によって神経細胞の接着性、突起伸長の程度が異なることが明らかになり、その分子機構解明へと研究を発展させつつある。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Watanabe,E.: "A monoclonal antibody identifies a novel epitope surrounding a subpopulation of the mammalian central neurons." Neuroscience. 20. 645-647 (1989)
[文献書誌] Watanabe,E.: "Preferential adhesion of chick central neurons to the gray matter of the central nervous system." Neurosci.Lett.97. 69-74 (1989)
[文献書誌] Fujita,S.C.: "Glycosaminoglycan-related epitopes surrounding different subsets of mammalian central neurons." Neurosci.Res.7. 117-130 (1989)
[文献書誌] Murakami,F.: "Regional difference of cell adhesion in culture on tissue substrata from rat central nervous system." Biomed.Res.10.Sup.2. 159-161 (1989)
[文献書誌] Higashi,S.: "Postnatal development of crossed and uncrossed corticorubral projections in kitten:a PHA-L study."
[文献書誌] Watanabe,E.: "Cell attachment to and neurite outgrowth on tissue sections of developing,mature and lesioned brain:a role of inhibitory factor(s)in the white matter."
[文献書誌] Murakami,F.: "Cellular mechanisms for reorganization of synaptic inputs after early brain damage.In:Brain Signal Transduction and Memory." Springer, 12 (1989)
[文献書誌] 村上富士夫: "ニュ-ロンの可塑性新生理学体系、第8巻2章" 医学書院, 10 (1989)

1989 年度 実績報告書

クライオカルチャ-、セルブロット法による神経成長・標的認識機構分子生物学的研究

研究代表者

村上 富士夫 大阪大学, 基礎工学部, 教授 (20089882)

研究成果

[文献書誌] Watanabe,E.: "A monoclonal antibody identifies a novel epitope surrounding a subpopulation of the mammalian central neurons." Neuroscience. 20. 645-647 (1989)

[文献書誌] Watanabe,E.: "Preferential adhesion of chick central neurons to the gray matter of the central nervous system." Neurosci.Lett.97. 69-74 (1989)

[文献書誌] Fujita,S.C.: "Glycosaminoglycan-related epitopes surrounding different subsets of mammalian central neurons." Neurosci.Res.7. 117-130 (1989)

[文献書誌] Murakami,F.: "Regional difference of cell adhesion in culture on tissue substrata from rat central nervous system." Biomed.Res.10.Sup.2. 159-161 (1989)

[文献書誌] Higashi,S.: "Postnatal development of crossed and uncrossed corticorubral projections in kitten:a PHA-L study."

[文献書誌] Watanabe,E.: "Cell attachment to and neurite outgrowth on tissue sections of developing,mature and lesioned brain:a role of inhibitory factor(s)in the white matter."

[文献書誌] Murakami,F.: "Cellular mechanisms for reorganization of synaptic inputs after early brain damage.In:Brain Signal Transduction and Memory." Springer, 12 (1989)

[文献書誌] 村上富士夫: "ニュ-ロンの可塑性 新生理学体系、第8巻2章" 医学書院, 10 (1989)

1989 年度実績報告書

村上富士夫大阪大学, 基礎工学部, 教授 (20089882)

[文献書誌] 村上富士夫: "ニュ-ロンの可塑性新生理学体系、第8巻2章" 医学書院, 10 (1989)