1989 年度実績報告書

Podocalyxinの構造と機能に関する薬理学的研究

研究課題

研究課題/領域番号	01480136
研究機関	東京大学
研究代表者	遠藤仁東京大学, 医学部(医), 助教授 (20101115)
研究分担者	鄭圭鎔東京大学, 医学部(医), 外国人研究員
キーワード	限外濾過 / Podocalyxin / 糖タンパク / 陰性荷電障壁 / puromycin aminonucleosideネフロ-ゼ / stains-all染色 / 単離糸球体
研究概要	腎での限外濾過機能の分子機序を解明するに当たり、腎糸球体に存在する糖タンパクの1つpodocalyxin(PCX)に着目して以下の実験を初年度に行なった。 1.糸球体内陰性荷電発現要素の同定及びその異常 1)実験ネフロ-ゼの作成と尿中タンパクの同定。ラットにPAN(puromycin aminonucleoside)を100mg/kg投与してネフロ-ゼラットを作成した。尿中には血漿タンパクのほかに糖タンパクも数種増量が認められた。Stains-all染色によりPCXのフラグメントであることが見出された。 2)PCXのネフロン内分布、及び単離糸球体内PCXの変動とネフロ-ゼ発症との関連性。ラット腎より構成ネフロン分節を単離し、マイクロゲル電気泳動を行ない、stains-all染色でPCXを定量すると、糸球体のみに存在していた。PANネフロ-ゼラット腎糸球体のPCXは尿中タンパクの増加を示さないPAN投与2日目より既に低下を示し、PCXの閾値以下で限外濾過が障害を受けることが判明した。 2.Podocalyxinの微量免疫定量法の確立 1)PCXの分離精製。正常ラット腎から糸球体を単離し、可溶化後、WGA(weat germ agglutinin)-sepharose 4B affinity column chromatographyと高速液体クロマトグラフィ-によりPCXを精製した。PCXは分子量約130,000の糖タンパクであることが同定された。 2)PCX抗体の作製、精製PCXをウサギに免疫し抗体(ポリクロナル)を作製できた。これを用いてRIA(radioimmunoassay)系を確立する予定である。

研究成果

(14件)

すべてその他

すべて文献書誌 (14件)

[文献書誌] Endou,H.et al.: "Intranephron distribution of insulin binding in Wistar Kyoto and Spontaneously Hypertensive Rats" Proc.Japan Acad.(Ser.B). 65. 21-25 (1989)
[文献書誌] Jung,K.Y.et al.: "Nephrotoxicity assessment by measuring cellulay ATP content I.Substrate specificities in the maintenance of ATP content in isolated rat nephron segments" Toxicol.Appl.Pharmacol.100. 369-382 (1989)
[文献書誌] Jung,K.Y.et al.: "Nephrotoxicity assessment by measuring cellular ATP content II.Intranephron site of ochratoxin A nephrotoxicity" Toxicol.Appl.Pharmacol.100. 383-390 (1989)
[文献書誌] Endou,H.et al.: "Modell zur Untersuchung nephrotoxischer Wirkungen" Arzeimitteltherapie. 7. 162 (1989)
[文献書誌] Takahashi,T.et al.: "Intranephron distribution of purine-metabolizing enzymes in rats" Renal Physiol.Biochem.12. 287-294 (1989)
[文献書誌] Miyanoshita,A.et al.: "Inhibitory effect of cyclic AMP on phorobol esterstimulated production of reactive oxygen metabolites in rat glomeruli" Biochem.Biophys.Res.Comm.165. 519-525 (1989)
[文献書誌] Miyanoshita,A.et al.: "Furosemide directly stimulates prostaglandin E_2 prouction in the thick ascending limb of Henle's loop" J.Pharmacol.Exp.Ther.251. 1155-1159 (1989)
[文献書誌] Jung,K.Y.et al.: "Biophasic increasing effect of angiotensin-II on intracellular free calcium in isolated rat early proximal tubule" Biochem.Biophys.Res.Comm.165. 1221-1228 (1989)
[文献書誌] Endou,H.et al.: "Adenosine 2 receptor distribution along the rat nephron and its role in generation of oxygen metabolites in glomeruli" The Frontiers of nephrology. (1990)
[文献書誌] Takemoto,F.et al.: "Intranephron PGE_2 production in stroke-prone spontaneously hypertensive rats" Am.J.Physiol.(1990)
[文献書誌] Jung,K.Y.et al.: "Furosemide acts on short loop of descending thin limb,but not on long loop" J.Pharmacol.Exp.Ther.(1990)
[文献書誌] Jung,K.Y.et al.: "Cellular ATP production and consumption in the descending thin limb of Henle's loop in the rat" Renal Physiol.Biochem.(1990)
[文献書誌] 遠藤仁: "毒性生化学上・下(佐藤哲男、上野芳夫、遠藤仁編)" 地人書館, 623 (1989)
[文献書誌] 遠藤仁: "臨床生理学シリ-ズ4 腎臓 (黒川清、今井正編)" 南江堂, 315 (1989)

1989 年度 実績報告書

Podocalyxinの構造と機能に関する薬理学的研究

研究代表者

遠藤 仁 東京大学, 医学部(医), 助教授 (20101115)

研究成果

[文献書誌] Endou,H.et al.: "Intranephron distribution of insulin binding in Wistar Kyoto and Spontaneously Hypertensive Rats" Proc.Japan Acad.(Ser.B). 65. 21-25 (1989)

[文献書誌] Jung,K.Y.et al.: "Nephrotoxicity assessment by measuring cellulay ATP content I.Substrate specificities in the maintenance of ATP content in isolated rat nephron segments" Toxicol.Appl.Pharmacol.100. 369-382 (1989)

[文献書誌] Jung,K.Y.et al.: "Nephrotoxicity assessment by measuring cellular ATP content II.Intranephron site of ochratoxin A nephrotoxicity" Toxicol.Appl.Pharmacol.100. 383-390 (1989)

[文献書誌] Endou,H.et al.: "Modell zur Untersuchung nephrotoxischer Wirkungen" Arzeimitteltherapie. 7. 162 (1989)

[文献書誌] Takahashi,T.et al.: "Intranephron distribution of purine-metabolizing enzymes in rats" Renal Physiol.Biochem.12. 287-294 (1989)

[文献書誌] Miyanoshita,A.et al.: "Inhibitory effect of cyclic AMP on phorobol esterstimulated production of reactive oxygen metabolites in rat glomeruli" Biochem.Biophys.Res.Comm.165. 519-525 (1989)

[文献書誌] Miyanoshita,A.et al.: "Furosemide directly stimulates prostaglandin E_2 prouction in the thick ascending limb of Henle's loop" J.Pharmacol.Exp.Ther.251. 1155-1159 (1989)

[文献書誌] Jung,K.Y.et al.: "Biophasic increasing effect of angiotensin-II on intracellular free calcium in isolated rat early proximal tubule" Biochem.Biophys.Res.Comm.165. 1221-1228 (1989)

[文献書誌] Endou,H.et al.: "Adenosine 2 receptor distribution along the rat nephron and its role in generation of oxygen metabolites in glomeruli" The Frontiers of nephrology. (1990)

[文献書誌] Takemoto,F.et al.: "Intranephron PGE_2 production in stroke-prone spontaneously hypertensive rats" Am.J.Physiol.(1990)

[文献書誌] Jung,K.Y.et al.: "Furosemide acts on short loop of descending thin limb,but not on long loop" J.Pharmacol.Exp.Ther.(1990)

[文献書誌] Jung,K.Y.et al.: "Cellular ATP production and consumption in the descending thin limb of Henle's loop in the rat" Renal Physiol.Biochem.(1990)

[文献書誌] 遠藤仁: "毒性生化学 上・下(佐藤哲男、上野芳夫、遠藤仁 編)" 地人書館, 623 (1989)

[文献書誌] 遠藤仁: "臨床生理学シリ-ズ4 腎臓 (黒川清、今井正 編)" 南江堂, 315 (1989)

1989 年度実績報告書

遠藤仁東京大学, 医学部(医), 助教授 (20101115)

[文献書誌] 遠藤仁: "毒性生化学上・下(佐藤哲男、上野芳夫、遠藤仁編)" 地人書館, 623 (1989)

[文献書誌] 遠藤仁: "臨床生理学シリ-ズ4 腎臓 (黒川清、今井正編)" 南江堂, 315 (1989)