1991 年度実績報告書

胸腺細胞における細胞接着分子発現のT細胞分化及び活性化における意義

研究課題

研究課題/領域番号	01480167
研究機関	札幌医科大学
研究代表者	松浦晃洋札幌医科大学, 医学部, 講師 (70157238)
研究分担者	上出利光北海道大学, 免疫研究所免疫病態部門, 教授 (00160185) 岩木宏之札幌医科大学, 医学部, 助手 (60203353)
キーワード	胸腺細胞 / 接着分子 / 細胞外基質 / cDNAクロ-ニング
研究概要	生体内における胸腺細胞の増殖分化は、単に外来性のリンホカインだけでなく、細胞と細胞の直接の相互作用によって調節されていると考えられる。我々は胸腺細胞が細胞外基質であるフィブロネクチンと接着することにより造殖することを明らかにし、その反応を阻害する8H3抗体を作成した。8H3抗原を精製し、8つの部分ペプチド配列を決定した。それをもとに合成したオリゴヌクレオチドをプロ-ブとして用い、8H3抗原を多量に発現しているT細胞性白血病細胞から作成したcDNAライブリ-をスクリ-ニングし、反応する計72個を単離した。オリゴヌクレオチドとの反応性から4群に分類したcDNAクロ-ンの塩基配列を決定中である。またペプチドを合成し家兔に免疫して、ポリクロ-ナル抗体を作成して上記クロ-ン中に融合蛋白(LacZー8H3)が検出されるか否かを検討している。また胸腺細胞と胸腺上皮細胞との接着を阻害する7D3抗体を作成した。胸腺より真核細胞発現ベクタ-CDM8を用いてcDNAライブラリ-を作成した。ライブラリ-DNAをCOS細胞にトランスフェクションし、一過性発現したものを7D3抗体にて染色しセルソ-タ-によって陽性細胞を回収し、候補クロ-ンを得た。しかしながら確実な陽性クロ-ンはまだ得られておらず、同時にスクリ-ニングした中からCD82鎖は得られているので、cDNAライブラリ-を作成しなおして、再度スクリ-ニングを行なっている。以上のように、胸腺細胞の接着に関与する分子の一次構造決定が進行中であり、まもなく全構造が明らかにされるものと確信している。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Nagoya,S.,Kikuchi,K.and Uede,T.,: "Monoclonal antibody to a structure expressed on rat T cell subset." Microbiol.Immunol.
[文献書誌] Nomura.,Uede,T.,and Kikuchi,K.,: "Functional analysis of mononuclear cells infiltrating into tumors.VI.Modulation of lymphocyte adhesion to high endothelial venule by LMFーb." J.Immunol.
[文献書誌] Hara,I.,Sato,N.,Matsuura,A.,Cho,JーM.,Qi,W.,Torigoe,T.,Shinnick,T.M.,Young,R.A.,Kamidono,S.,and Kikuchi,K.,: "Development of monoclonal antibodies reacting against mycobacterial 65 kd heat shock protein by using recombinant truncated proteins." Microbiol.Immunol.35. 995-1007 (1991)
[文献書誌] Nomura,N.,Uno,E.,Tamura,Y.,Suzuki,A.,Kikuchi,K.,and Uede,T.: "Vascular endothelial cells capable of binding lymphocytes express R2・1A6 antigen.Life Science.Adv." Immunology and Allergy,.
[文献書誌] Kinebuchi,M.,Uede,T.,Matsuura,A.,and Kikuchi,K.: "A novel cell surface antigen involved in thymocyte and thymic epithelial cell adhesion." J.Immunol.146.
[文献書誌] 上出利光,鳥本悦宏,菊地浩吉: "臨床免疫 T細胞の活性化と接着分子" 日本臨牀社, 9 (1989)
[文献書誌] 杵渕幸,菊地浩吉,上出利光: "日本臨牀増刊,臨床免疫下巻モノクロ-ナル抗体を用いた免疫機構の解析" 日本臨牀社, 6 (1990)

1991 年度 実績報告書

胸腺細胞における細胞接着分子発現のT細胞分化及び活性化における意義

研究代表者

松浦 晃洋 札幌医科大学, 医学部, 講師 (70157238)

研究成果

[文献書誌] Nagoya,S.,Kikuchi,K.and Uede,T.,: "Monoclonal antibody to a structure expressed on rat T cell subset." Microbiol.Immunol.

[文献書誌] Nomura.,Uede,T.,and Kikuchi,K.,: "Functional analysis of mononuclear cells infiltrating into tumors.VI.Modulation of lymphocyte adhesion to high endothelial venule by LMFーb." J.Immunol.

[文献書誌] Hara,I.,Sato,N.,Matsuura,A.,Cho,JーM.,Qi,W.,Torigoe,T.,Shinnick,T.M.,Young,R.A.,Kamidono,S.,and Kikuchi,K.,: "Development of monoclonal antibodies reacting against mycobacterial 65 kd heat shock protein by using recombinant truncated proteins." Microbiol.Immunol.35. 995-1007 (1991)

[文献書誌] Nomura,N.,Uno,E.,Tamura,Y.,Suzuki,A.,Kikuchi,K.,and Uede,T.: "Vascular endothelial cells capable of binding lymphocytes express R2・1A6 antigen.Life Science.Adv." Immunology and Allergy,.

[文献書誌] Kinebuchi,M.,Uede,T.,Matsuura,A.,and Kikuchi,K.: "A novel cell surface antigen involved in thymocyte and thymic epithelial cell adhesion." J.Immunol.146.

[文献書誌] 上出 利光,鳥本 悦宏,菊地 浩吉: "臨床免疫 T細胞の活性化と接着分子" 日本臨牀社, 9 (1989)

[文献書誌] 杵渕 幸,菊地 浩吉,上出 利光: "日本臨牀増刊,臨床免疫下巻 モノクロ-ナル抗体を用いた免疫機構の解析" 日本臨牀社, 6 (1990)

1991 年度実績報告書

松浦晃洋札幌医科大学, 医学部, 講師 (70157238)

[文献書誌] 上出利光,鳥本悦宏,菊地浩吉: "臨床免疫 T細胞の活性化と接着分子" 日本臨牀社, 9 (1989)

[文献書誌] 杵渕幸,菊地浩吉,上出利光: "日本臨牀増刊,臨床免疫下巻モノクロ-ナル抗体を用いた免疫機構の解析" 日本臨牀社, 6 (1990)