エイズウイルス逆転写酵素に対する抗体の疫学的意義の研究

1989 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 01480196
• 研究機関: 群馬大学
• 研究代表者: 星野 洪郎 群馬大学, 医学部, 教授 (00107434)
• 研究分担者: 山本 昭子 群馬大学, 医学部, 助手 (70092012) ; 竹内 康裕 群馬大学, 医学部, 助手 (70188168)
• キーワード: AIDS(Acquired immunedeficieny Syndromel) / HIV(Human immunodeficiency virus) / 逆転写酵素 / 抗体

研究概要

1.日本人血友病患者からHIV-1を5株分離した。分離株を、HIV〔GUN-1〕、HIV〔GUN-2〕、HIV〔GUN-3〕、HIV〔GUN-4〕、HIV〔GUN-5〕と名付けた。日本在住カナダ人同性愛AIDS患者より、HIVを分離し、HIV〔GUN-6〕とした。
2.不活化し、感染性を失なった、バイオハザ-ド的には安全なウィルスでも、その逆転写酵素は、抗原性を保持するか検討した。条件を検討したところ、β-プロピオラクトン処理、および熱処理(60℃1時間)のいずれでも、ウィルスの感染性は完全に失くなった。安全のため、二つの方法の処理を併用したが、逆転写酵素の抗原性は、ウエスタン・ブロット法で判定する限り、変化はなかった。
3.HIVの溶解液を逆転写酵素源とし、抗HIV抗体陽性者の血清を含むヒト血清との反応性を調べた。まず、逆転写酵素測定系に、血清を加え酵素活性に影響を与えるかどうか検討した。ウィルスに対する抗体を含まない血清でも、かなりの割合で酵素活性に強い影響を与えるものがあった。この原因のひとつは、入手先、保存の状態などの異なる条件の血清のサンプルを用いたためと考えられた。
次に、逆転写酵素の熱不活化に対する血清の影響を調べた。56℃30分の熱処理で、HIV-1の逆転写酵素は、不活化された。抗ウィルス抗体陽性血清の添加で、不活化が抑制された。正常人、あるいは他の病気のヒトの血清は影響を与えなかった。抗体陽性血清よりIgGを精製し、反応系に入ると同様な現象が認められた。また、ウィルスより精製した逆転写酵素を用いても、抗ウィルス抗体陽性血清で、酵素の不活化が抑制された。すなわち、逆転写酵素に対するIgG抗体が、酵素の熱不活化を抑制-酵素を安定化-していることが分った。今後は、このアッセイ系を用い、抗体の推移と病態・病期との関連を主に検討したい。

研究成果

• [文献書誌] Hoshino,H.,Seki,J.,Takeuchi,Y.: "New antifungal antibiotics benanomycins A andB inhibit infection with human immunodeficiency virus(HIV)and syncytium formation by HIV." J.Antibiotics.42. 344-346 (1989)
• [文献書誌] Seki,J.,Shimada,N.,Takahashi,K.,Takita,T.,Takeuchi,T.,Hoshino,H.: "Inhibition of infectivity of human immunodeficiency virus by a novel nucleoside,oxetanocin,and related compounds." Antimicrob.Agents Chemother.33. 773-775 (1989)
• [文献書誌] Suetake,N.,Takeuchi,Y.,Shimizu,N.,Uesato,H.,Kuroume,T.,Hoshino,H.,: "Frequent lack of antibodies against human T-cell leukemia virus type I gag proteins p24 or p19 in sera of patients with adult T-cell leukemia." J.Cancer Res.Clin.Oncol.115. 279-284 (1989)
• [文献書誌] Shimizu,N.,Okamoto,T.,Moriyama,E.N.,Takeuchi,Y.,Gojobori,T.,Hoshino,H.: "Patterns of nucleotide substitutions and implications for the immunological diversity of human immunodeficiency virus." FEBS.Lett.250. 591-595 (1989)
• [文献書誌] Takehara,N.,Iwahara,Y.,Uemura,Y.,Sawada,T.,Ohtsuki,Y.,Iwai,H.,Hoshino,H.,Miyoshi,I.: "Effect of immunization on HTLV-1 infection in rabbits." Int.J.Cancer. 44. 332-336 (1989)