1990 年度実績報告書

遺伝子工学的手法によるヒト自己抗体産生機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号	01480214
研究機関	東北大学
研究代表者	佐々木毅東北大学, 医学部, 助教授 (50110656)
研究分担者	佐野浩秋田農業短期大学, 生物工学研究所, 教授 (20178809) 遠藤一靖東北大学, 医学部, 講師 (60125507)
キーワード	自己抗体 / 抗DMA抗体 / V_H遺伝子 / In situ ハイブリダイゼ-ション
研究概要	(1)自己免疫病例のBリンパ球における免疫グロブリンV_H遺伝子のファミリ-の発現状態を把握し、生体における自己抗体の起源の分子生物学的理解に貧することを試みた。このためにヒトV_H遺伝子(VHI〜VHVI)プロ-ブを用いin situハイブリダイゼ-ション法の確立を計った。各プロ-ブDNAは相同性が高いために各々の議別が困難であった。しかし、(下述の)我々が明らかとしてOー81及びNEー1 70ー1(VHIII及びVHIV)等をコントロ-ルとして用い、方法の確立を行った。 (2)ヒトモノクロナル抗DNA抗体産生細胞の超可変部位遺伝子、DNA配列を明らかとした。腎障害生抗DNA抗体中に表現されるOー81及びNEー1イディオタイプを有するOー81クロ-ンのV_k及びNEー1クロ-ンのV_H,V_kを規定する遺伝子は、germline遺伝子と100%の相同生を有していた。この事より、SLEの病初期に発現する病原生抗DNA抗体産生クロ-ンの増大には、外来困子(微生物等)の抗原刺激は、少くとも重要な役割を果たさないことが強く示唆された。又、重症筋無力症の発現に重要な、アセチルユリンレセプタ-に対するIgG型ヒトモノクロナル抗体活生を規定する遺伝子配列の解析も行った。(3)Oー81及びNEー1のV_H遺伝子の超可変部(CDR)を構成するオリゴヌクレオチドを作成した。これを用いてヒト生体内での自己抗体遺伝子の発現,分布様式を、in situハイブリダ-ゼイション法で検索するための基礎検討を行っている。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Muryoi T,<Sasaki T>___ー,Hatakeyama A,Shibata S,Suzuki M,Seino J and Yoshinaga K.: "Clonotypes of antiーDNA antibodies expressing specific idiotypes in immune complexes of patients with active lupus nephritis." J.Immunology. 144. 3856-3861 (1990)
[文献書誌] Hatakeyama A,<Sasaki T>___ー,Muryoi T,Murai C and Yoshinaga K.: "Are the clonotypes of serum IgG antiーDNA antibodies associated with lupus nephritis in humans?" Tohoku J.Exp.Med.160. 213-221 (1990)
[文献書誌] Harata N,<Sasaki T>___ー,Osaki H,Saito Y,Shibata S,Muryoi T,Takai O and Yoshinaga K.: "Therapeutic treatment of New Zealand mouse disease by a limited number of antiーidiotypic antibodies conjugated with neocarzinostatin." J.Clin.Invest.86. 769-776 (1990)
[文献書誌] <Sasaki T>___ー,Hatakeyama A,Shibata S,Osaki H,Suzuki M,Horie K,Kitagawa Y and Yoshinaga K.: "Heterogeneity of immune complexーderived antiーDNA antibodies associated with lupus nephritis." Kidney International. (1991)
[文献書誌] Harata N,<Sasaki T>___ー,Shibata S,Kameoka J,Hirabayashi Y,Osaki H,Tamate E and Yoshinaga K.: "Selective absorption of antiーDNA antibodies and their idiotypeーpositive cells in vitro using an antiーidiotypic antibodyーaffinity column,possible application to plasma exhange." Journal of Clinical Apheresis. (1991)
[文献書誌] <Sasaki T.>___ー: "AntiーDNA idiotypes and antiーidiotypes in systemic lupus erythematosus." Jpn.J.Med.19. (1991)

1990 年度 実績報告書

遺伝子工学的手法によるヒト自己抗体産生機構の解析

研究代表者

佐々木 毅 東北大学, 医学部, 助教授 (50110656)

研究成果

[文献書誌] Muryoi T,<Sasaki T>___ー,Hatakeyama A,Shibata S,Suzuki M,Seino J and Yoshinaga K.: "Clonotypes of antiーDNA antibodies expressing specific idiotypes in immune complexes of patients with active lupus nephritis." J.Immunology. 144. 3856-3861 (1990)

[文献書誌] Hatakeyama A,<Sasaki T>___ー,Muryoi T,Murai C and Yoshinaga K.: "Are the clonotypes of serum IgG antiーDNA antibodies associated with lupus nephritis in humans?" Tohoku J.Exp.Med.160. 213-221 (1990)

[文献書誌] Harata N,<Sasaki T>___ー,Osaki H,Saito Y,Shibata S,Muryoi T,Takai O and Yoshinaga K.: "Therapeutic treatment of New Zealand mouse disease by a limited number of antiーidiotypic antibodies conjugated with neocarzinostatin." J.Clin.Invest.86. 769-776 (1990)

[文献書誌] <Sasaki T>___ー,Hatakeyama A,Shibata S,Osaki H,Suzuki M,Horie K,Kitagawa Y and Yoshinaga K.: "Heterogeneity of immune complexーderived antiーDNA antibodies associated with lupus nephritis." Kidney International. (1991)

[文献書誌] <Sasaki T.>___ー: "AntiーDNA idiotypes and antiーidiotypes in systemic lupus erythematosus." Jpn.J.Med.19. (1991)

1990 年度実績報告書

佐々木毅東北大学, 医学部, 助教授 (50110656)