軟骨形成不全症の病因と病態に関する分子生物学的研究

1989 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 01480264
• 研究機関: (財)東京都臨床医学総合研究所
• 研究代表者: 鈴木 義之 東京都臨床医学総合研究所, 副所長 (90010389)
• 研究分担者: 山中 龍宏 焼津市立病院, 小児科, 医長 (00143462) ; 長尾 芳朗 東京都臨床医学総合研究所, 臨床遺伝, 流動研究員 (60211439) ; 伊藤 幸司 東京都臨床医学総合研究所, 臨床遺伝, 研究員 (00184656) ; 大島 章弘 東京都臨床医学総合研究所, 臨床遺伝, 主任研究員 (20203763) ; 桜庭 均 東京都臨床医学総合研究所, 臨床遺伝, 室長 (60114493)
• キーワード: 軟骨形成不全症 / 優性遺伝病 / 二次元電気泳動 / マイコプラスマ感染 / 線維芽細胞

研究概要

軟骨形成不全症は、骨及び軟骨の形成不全を示す優性遺伝病であり、その病因は現在のところ全く不明である。本研究においては、この疾患を遺伝子異常の表現である蛋白質のレベルで検索し、その病因と病態を明らかにするとともに、生化学的、細胞学的アプロ-チをもとに、この病気の治療、予防の可能性を探ることを目的とする。そのためには細胞を構築する蛋白質の正確な分離同定法が必要となる。
本年度は基礎的な方法論の確立と試料採取をおこない、方法の妥当性を検討した。この病気は中胚葉性の組織に病変があり、従って試料もそこに発現している細胞を用いる必要があるが、発生学的な分化、細胞の性質を考慮して、線維芽細胞をえらんだ。蛋白抽出条件を確立后、二次元電気泳動による分離、検出をおこない、それぞれのスポットをコンピュ-タを用いて同定する試みをおこなった。一応両現性のある結果が得られ、400種以上の蛋白質を認識することができた。
次に細胞の条件によるパタ-ン変動でしらべた。年令、性など、それぞれの個体の一般的条件による変動はなかったが、培養中にマイコプラスマ感染をおこした細胞では、6つの新しいスポットが出現し、疾患分析をおこなう上に考慮しなければならないことが分った。これまでに数例の軟骨形成不全症患者由来の蛋白質分析をおこない、その一部に、2つの異常と思われるスポットを検出した。ただしこれらのスポットの出現は、同一細胞であっても必ずしも全く同じ出現様式を示すとはかぎらないようであり、来年度以降、更に検討をすすめたい。

研究成果

• [文献書誌] Yang RーC,Tsuji A,Suzuki Y: "Two-diwensional electrophoresis aided by personul cowputer analysis for scrceing of mutaut protenus in inheited" Electrophoresis. 10. 785-792 (1989)
• [文献書誌] Iwasaki Y,Tsuji A,Omura K,Suzuki Y: "Puribi cation and clearateization of β-manuosidase from lcuwars placento" Journal of Biodemistry. 106. 331-335 (1989)
• [文献書誌] Nalcano T,Nanba E,Tanaka A,Ohuo K,Suzuki Y,Suzuki K: "A newpoiut wutation with exons of β-hexosonsiuidase α geue in a Japauese uisfaut Tay-Saches diseese" Anuels of Neurbgy. (1990)
• [文献書誌] Yang R-C,TsujiA.Suzuki Y: "Abuorwalpsotein spots sevealcd by two diweusional esectno plonesis in wycoplaswa-mfected lcywar fitroblasts" Electrophoresis. (1990)
• [文献書誌] Iyoda K,Nishizawa M,Yonezawa M,Tanaka J,Suzuki Y: "Normcl protislipid proteiu couteut in cerebsal white watter in a cose with clasjic type of pelizaeus-merzbacher diseese" Brain Dysfnuction. (1990)
• [文献書誌] Itoh K,Oshima A,Sakuraba H,Suzuki Y: "Exprestion,glycosylation,and futracelcykar diotuibvtuib of hurwas β-galactosidase in secombiuact baculovirs-mfesed spodeptera bugiperda cells" Biochemical and Biophqsical Rescarcb Cowucei a tion. (1990)