Thyー1陽性樹枝状表皮細胞におけるT細胞レセプタ-の分子生物学的・生化学的研究

1990 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 01480265
• 研究機関: 山梨医科大学
• 研究代表者: 島田 眞路 山梨医科大学, 医学部, 助教授 (10114505)
• 研究分担者: 大竹 直人 山梨医科大学, 医学部, 助手 (40194188) ; 窪田 泰夫 山梨医科大学, 医学部, 助手 (10126047)
• キーワード: Thyー1^+dendritic epidermal Cell / T cell receptor / T cell receptor γδ / perforin / Killer T cell / ILー2 / nude mouse / rat

研究概要

本研究の目的は第1にThyー1陽性樹枝状表皮細胞(Thyー1^+DEC)のT細胞レセプタ-(TCR)表現を検討することである。Thyー1^+DECを約50倍にecrichし、抗CD3モノクロ-ナル抗体や抗γ鎖抗体による免疫沈降法により、35kd,45kdのTCRγδをdetectした。Thyー1^+DECは、TCRαβではなくTCRγδを表現することが明らかとなった。第2の目的は、その機能を検討することである。われわれはヌ-ドマウス由来Thyー1^+DEC細胞株又はクロ-ンを樹立した。細胞障害活性を検討したところ、NK感受性、非感受性細胞を障害した。またキラ-T細胞に特異的なパ-フォリンの存在を検討したところ、mRNAレベル、タンパクレベルで表現していることが明らかとなった。そこで、Thyー1^+DECがin vivoでパ-フォリンを表現するかどうかを検討した。FACSを用いて、抗TCRγδ抗体で純化したThyー1^+DECは、ほとんどすべての細胞がパ-フォリンをもっていた。これはThyー1^+DECはそのリガンドは未だ不明ではあるが、in situでキラ-T細胞の性質をもつことを意味する。これは本細胞が免疫防御機構のなかでfirst defenseの役割をはたすものと思われる。第3に老化によるThyー1^+DECの数の変動を検討した。Thyー1^+DECは老化マウスでは有意に減少していた。そこでILー2投与により、その数の増加を期待したところ、若年マウスに比して反応程度は弱いものの、ILー2によりその数が増加することを見出した。その細胞はCD3^+TCRγδ^+であり、Thyー1^+DECそのものが増加するものと考えられる。第4にThyー1^1DECはマウスのみに存在するとされ、ヒトをはじめその他のspeciesではその存在が明らかでなかった。われわれはラットのThyー1^+DEC相当細胞を同定する目的で、新しくdevelopされたラットの抗CD3モノクロ-ナル抗体を用いて検討した。ラットにはCD3^+TCRαβ^-の樹枝状細胞が表皮内にマウスと同等数存在することを確認した。

研究成果

• [文献書誌] Shinji Shimada,et al: "Freshly isolated Thyー1^+dendritic epidermal cells express T cell receptor γδーCD_3" Journal of Dermatological Science. 1. 459-464 (1990)
• [文献書誌] Tetsuji Kobata,Shinji Shimada,et al: "Thyー1 positive dendritic epidermal Cells contain a Killer protein perforin" International Immunology. 2. 1113-1116 (1990)
• [文献書誌] Naotaka Shibagaki,Kunihiko Tamaki,Shinji Shimada: "In vivo administration of recombinant ILー2 increases the number of Thyー1^+dendritic epidermal Cells" British Journal of Dermatology.
• [文献書誌] Shinji Shimada,etal: "Identification of an equivalent to murine Thyー1^+dendritic epidermal cells in rat epidermis"
• [文献書誌] 島田 眞路,他: "Thyー1^+樹枝状表皮細胞におけるT細胞レセプタ-γδの表現ーupdateー" Human Cell. 3. 226-232 (1990)
• [文献書誌] 島田 眞路: "γδT細胞" Immunology Frontier. 1. 44-47 (1991)
• [文献書誌] 島田 眞路: "現代皮膚科学大系 Thyー1陽性樹枝状表皮細胞" 中山書店, 6 (1989)
• [文献書誌] 島田 眞路: "アレルギ-性皮膚疾患 Thyー1陽性樹枝状表皮細胞" 協和企画, 8 (1989)