| 研究課題/領域番号 |
01480424
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
寺島 達夫 東京医科歯科大学, 歯学部, 助教授 (20114770)
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| 研究分担者 |
大迫 正文 東京医科歯科大学, 歯学部, 助手 (60152104)
大井田 新一郎 東京医科歯科大学, 歯学部, 助手 (10114745)
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| キーワード | 歯胚 / 器官培養 / エナメル質形成 / 免疫組織 / エナメルタンパク質 |
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| 研究概要 |
1.歯胚成分を抗原としたモノクロナ-ル抗体の作製においては、牛後4日齢〜1週齢のマウス臼歯歯胚を抗原として用い、ラットに免疫し、通法によりマウス骨髄腫細胞を用いて細胞融合をおこない、ラットモノクロナ-ル抗体の作製を行なた。しかし、特異的抗体を得ることが出来なかったため、IN VITROモノクロナ-ル抗体作製法を用いて再度抗体の作製を行っている状況である。
2.培養歯胚におけるエナメル芽細胞の分化にともなう微細構造学的観察では、胎生16.5日齢のマウス胎仔の下顎臼歯を器官培養して、培養4日目に内エナメル上皮がエナメル芽細胞に分化し、培養8日目になると典型的な基質形成期のエナメル芽細胞の微細構造を示し、エナメル質基質の分泌を開始する。その後、培養16日目以後では、成熟期のエナメル芽細胞に分化発育し、遠位端に刷糸縁の形成も認められた。
3.前年度作製した抗体等を用いた生体内発育歯胚および培養歯胚におけるエナメルタンパク質に対する免疫組織化学的検索では、エナメルタンパク質の局在及びその発現において、、生体内発育歯胚と培養歯胚との間には、培養歯胚における発育の遅延に相当するエナメルタンパク質の発現の遅れを除き、基本的には同一であった。しかし、培養歯胚のうちで石灰化が不良な歯胚では、象牙質基質内にエナメルタンパン質が広範囲に分布している場合も、免疫電顕的に観察された。
4.再構成歯胚におけるエナメル芽細胞の分化に及ぼす間葉組織の影響では、マウス歯胚を酵素処理することにより上皮と間葉組織との分離した後、胎生15.5、16.5、17.5、18.5日齢の歯胚で再構成してエナメル芽細胞の分化を観察した。胎生15.5、16.5、17.5日齢の場合では、再構成歯胚においてエナメル芽細胞は分化し、エナメル質を形成した。胎生18.5日齢では実験結果が不定で、現在再実験を行っている。
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